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糖異生系列 丙酮酸羧化酶（PC）測試盒
貨號：BC0730
規格：100管/96樣
測試方法：微量法
測定意義：
丙酮酸羧化酶(pyruvate carboxylase，PC，EC 6.4.1.1)廣泛存在于動物、霉菌和酵母的線粒體中，催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi，是糖異生過程的*個限速酶，在保證血糖的動態平衡方面起著重要的作用。
測定原理：
PC催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi，蘋果酸脫氫酶進一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+，在340nm下測定NADH氧化速率，即可反映PC活性
需自備的儀器和用品：
分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、 樣本的前處理組織、細菌或細胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離： 1、 稱取約0.1g 組織或收集500 萬細菌或細胞，加入1mL 提取液，用冰浴勻漿器或研缽勻漿。 2、 將勻漿600g，4℃離心5min。 3、 棄沉淀，將上清液移另一離心管中，11000g，4℃離心10min。 4、 上清液即胞漿提取物，可用于測定從線粒體泄漏的PC（此步可選做）。 5、 在步驟④的沉淀中加入1mL 提取液，超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3秒，間隔10 秒，重復30 次），用于線粒體PC 活性測定。
二、測定步驟 1、 分光光度計預熱30min 以上，調節波長340nm，蒸餾水調零。
2、 工作液的配制：臨用前將試劑二和試劑三轉移到試劑一中混合溶解待用；置于37℃(哺乳動物) 或25℃(其它物種)預熱5 分鐘；用不完的試劑4℃保存一周；試劑四的配制：在試劑四瓶中加入2.5mL 蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑4℃保存一周；
3、 在1mL 石英比色皿中加入50μL 樣本、50μL 試劑四和900μL 工作液，立即混勻，記錄340nm 處初始吸光值A1 和 2min 后的吸光值A2，計算A=A1-A2。注意：在該試劑盒中，若ΔA 大于0.5，需將樣本用提取液稀釋適當倍數后測定，使ΔA 小于0.5 可提高檢測靈敏度。計算公式中乘以相應稀釋倍數。
糖異生系列 丙酮酸羧化酶（PC）測試盒訂購說明：
1、絕大部分產品備有現貨，一般情況下都能訂貨當日發貨。
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3、部分產品價格會因貨期、批次等因素發生變化，若有變動以訂貨當日新價格為準。
4、每日訂單截止時間為16點整，部分城市可到17點整，因超過截止時間造成當日不能發貨的將于次日安排發貨。
5、請辦理完貨款后，將收據、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。
運輸說明：
1、極低溫產品：極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩定如一，為您的實驗保駕護航。
2、低溫產品：低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴實密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩定如一，為您的實驗保駕護航。
3、常溫產品：常溫產品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產品由公司庫房人員快速配貨，準確快速高效的快遞保證產品快速送達您的手中。
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