首頁 >> 供求商機
土壤蔗糖酶檢測試劑盒 可見分光光度法
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義: S-SC 能夠水解蔗糖變成相應的單糖而被機體吸收,其酶促作用產物與土壤中有機質、 氮、磷含量,微生物數量及土壤呼吸強度密切關,是評價土壤肥力的重要指標。
測定原理: S-SC 催化蔗糖降解產生還原糖,進一步與 3,5-二硝基水楊酸反應,生成棕紅色氨基 化合物,在 510nm 有特征光吸收,在一定范圍內 510nm 光吸收增加速率與 S-SC 活性成正比。
自備用品: 可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰、甲 苯(不允許快遞)和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:甲苯 5mL×1 瓶,4℃保存;(自備)
試劑二:液體 15mL×1 瓶,4℃保存;
試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前每瓶加入 40mL蒸餾水充分溶解備用;用不完的試劑 4℃保存;
試劑四:液體 30mL×1 瓶,4℃保存。
充分混勻,95℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失),流水冷卻后充分混勻,蒸餾水稀釋 10 倍后(可以吸取 100μL,加入 900μL蒸餾水稀釋;如果吸光度大于 4,可以適當加大稀釋 倍數),510nm處蒸餾水調零,讀吸光值 A。計算 ΔA=A 測定管-A 對照管。每個測定管需設 一個對照管。
S-SC活性計算: 標準條件下測定的回歸方程為 y = 4.9x -0.062;x 為標準品濃度(mg/mL),y為吸光值。
單位的定義:每天每 g土樣中產生 1mg 還原糖定義為一個 S-SC 活力單位。
S-SC 活力(mg/d /g 土樣)=( ΔA+0.062) ÷4.9×10×V 反總÷W÷T =20.7×(ΔA+0.062) 10:稀釋倍數;T:反應時間,1d; V 反總:反應體系總體積:1.015mL;W:樣本質量, 0.1g。