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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 250g |
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貨號 | L8290 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,石油 |
主要用途 | 用于發酵工程、基因工程和分子生物學中大腸桿菌的培養。 |
LB營養瓊脂 L8290 微生物培養
有效期 | 3年 |
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BR | |
別名 | LB培養基 LB固體培養 |
英文名稱 | LB Nutrient Agar |
儲存條件 | RT |
單位 | 瓶 |
用途:用于發酵工程、基因工程和分子生物學中大腸桿菌的培養。
成分(g/L)
胰蛋白胨 10.0g
酵母浸粉 5.0g
氯化鈉 5.0g
瓊脂 12.0g
PH值 7.0±0.2
用 法:稱取本品32克,溶解于1000ml蒸餾水中, 121℃高壓滅菌15分鐘,備用。
質量控制和典型特征: 接種10-100個大腸桿菌JM109、HB101在36±1℃培養18-24小時,生長明顯。
LB營養瓊脂 L8290 微生物培養
培養基(Medium)是供微生物、植物組織和動物組織生長和維持用的人工配制的養料。那么LB培養基是什么培養基?LB一般被解釋為Luria-Bertani,然而根據其發明人貝爾塔尼(Giuseppe Bertani)的說法,這個名字來源于英語lysogeny broth,即溶菌肉湯。LB培養基是近年來用于培養基因工程受體菌(大腸桿菌)的常用培養基之一。
LB培養基是一種培養基的名稱,是微生物學實驗中的培養基,生化分子實驗中一般用該培養基來預培養菌種,使菌種成倍擴增,達到使用要求.可分為液體培養基和固體培養基。
LB培養基是一種應用泛和普通的細菌基礎培養基,有時又稱普通培養基,含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl。
酵母提取物:酵母經破壁后將其中蛋白質、核酸、維生素等抽提,再經生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、維生素等天然活性成分的淡黃色粉末,其中氨基酸含量30%以上,總蛋白50%以上,核苷酸10%以上,廣泛用作生物培養基和食品調味品制造原料。
胰化蛋白胨:一種優質蛋白胨,是以新鮮牛肉和牛骨經胰酶消化,濃縮干燥而成的白色粉末,含有豐富的氮源、氨基酸等。
酵母提取物為微生物提供碳源、能源、磷酸鹽、生長因子、維生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生長環境(如滲透壓),其次是提供無機鹽。
在配制固體培養基時還要加入一定量瓊脂作凝固劑。瓊脂在常用濃度下96℃時溶化,一般實際應用時在沸水浴中或墊以石棉網直接煮沸溶化。瓊脂在40℃時凝固,通常不被微生物分解利用。固體培養基中瓊脂的含量根據瓊脂的質量和氣溫的不同而有所不同。
由于這種培養基多用于培養細菌,因此,要用稀酸或稀堿將其pH調中性或微堿性,以利于細菌的生長繁殖。
LB培養基用途
用于一般細菌培養,特別用于分子生物學試驗中大腸桿菌的保存和培養。
LB培養基使用原理:
蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;葡萄糖提供碳源;瓊脂是培養基的凝固劑。
LB培養基配制方法
配制每升培養基,應該在950 ml去液態lb培養基離子水中加入:胰化蛋白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g 搖動容器直溶質溶解。用5mol/LNaOH調pH7.0。用去離子水定容1L。在15psi高壓下蒸汽滅菌20min。
LB固體培養基1L和液體一樣,加15g瓊脂粉,一定要在溫度降下之前加好抗固態LB培養基生素,并且倒好板。
LB固體培養基倒板
1.配制:100ml LB培養基加入1.5g瓊脂粉。
2.抗生素的加入:高壓滅菌后,將融化的LB固體培養基置與55℃的水浴中,待培養基溫度降到55℃時(手可觸摸)加入抗生素,以免溫度過高導致抗生素失效,并充分搖勻。
3.倒板:一般10ml倒1個板子。培養基倒入培養皿后,打開蓋子,在紫外下照10-15分鐘。
4.保存:用封口膠封邊,并倒置放于4℃保存,一個月內使用。 配400ml的話成分按比例減少就行了,pH還是要按規定的。
LB培養基設計不同的離子對大腸桿菌生長狀況的影響
以下方法僅供參考:
1.首先養幾個平板固體培養基培養的大腸桿菌,保證這些細菌來自于同一個克隆;
2.采用液體培養并用分光光度計測定濁度來評價大腸桿菌生長。
3.鹽可選擇氯化鈉、、氯化鎂、氯化鋅、銨鹽、磷酸鹽等;
4.濃度差別可做,可不做;
5.因為分光光度計的準確性有一定要求,培養時間就不能太長,多8小時;
根據這些條件設計實驗就容易了。大體上是,先配制好各種液體培養基;然后從1中挑一個菌落放到一個起始的基本LB液體培養基,培養到稍微有點渾時,就可以向各種培養基中加同樣體積的細菌;后就是測定OD值了。記得每個培養基做3個重復管。
參考文獻:
《Capsid protein Vp1 from chlamydiaphage φCPG1 effectively alleviates cytotoxicity induced by Chlamydia trachomatis》 作者:Jie Ren Yuanli Guo Lili Shao Yuanjun Liu Quanzhong Liu 期刊:Experimental and Therapeutic Medicine 影響因子:1.825 PMID:30233675