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目錄:北京索萊寶科技有限公司>>蛋白質(zhì)研究>>Western blot>> SW1010Western blotting(小鼠IgG) DAB法顯色試劑盒

Western blotting(小鼠IgG) DAB法顯色試劑盒
  • Western blotting(小鼠IgG) DAB法顯色試劑盒
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參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號 SW1010
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 北京市
屬性

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更新時(shí)間:2024-07-29 11:28:32瀏覽次數(shù):1056評價(jià)

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更多產(chǎn)品
Western blotting(小鼠IgG) DAB法顯色試劑盒
貨號:SW1010
規(guī)格:一盒
-20℃避光密閉保存,一年有效。若經(jīng)常使用,可將封閉試劑,抗體稀釋液和 20 倍 DAB 顯色液 B 存放于2-8℃以方便使用。

Western blotting(小鼠IgG) DAB法顯色試劑盒
 

貨號:
SW1010 Western blotting (小鼠 IgG)DAB 顯色試劑盒
SW1020 Western blotting (兔 IgG)DAB 顯色試劑盒
SW1030 Western blotting (山羊 IgG)DAB 顯色試劑盒
SW1040 Western blotting(小鼠/兔 IgG)DAB 顯色試劑盒


產(chǎn)品內(nèi)容:
    1. 封閉試劑 30g。
    2. 10 倍濃縮抗體稀釋液  50ml。
    3. HRP 標(biāo)記二抗,  0.5ml,效價(jià) 1:500-3000。
    4. 20 倍 DAB 濃縮顯色液,5mlA+5mlB。

 

保存:
    -20℃避光密閉保存,一年有效。若經(jīng)常使用,可將封閉試劑,抗體稀釋液和 20 倍 DAB 顯色液 B 存放于2-8℃以方便使用。


產(chǎn)品簡介:
    SDS-PAGE電泳后,蛋白質(zhì)按照分子量大小分離,轉(zhuǎn)移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)后,固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì),以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原,與對應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng),再與酶標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng),經(jīng)過底物顯色以檢測電泳分離的特異性的蛋白。

    經(jīng)過PAGE分離的蛋白質(zhì)樣品,轉(zhuǎn)移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì),且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學(xué)活性不變。以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原,與對應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng),再與酶或同位素標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng),經(jīng)過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達(dá)的蛋白成分。該技術(shù)也廣泛應(yīng)用于檢測蛋白水平的表達(dá)。Western blotting 檢測系統(tǒng)除需要過氧化物酶標(biāo)記的各種二抗外,還需要配套的顯色試劑。索萊寶提供DAB顯色和ECL化學(xué)發(fā)光兩種試劑及相應(yīng)試劑盒。


操作步驟:(僅供參考)
常規(guī)電泳轉(zhuǎn)膜后:
     1) 清洗轉(zhuǎn)印膜:將膜剝離下后,作好標(biāo)記,一般在左上角剪一缺口。室溫用 TBS-T 漂洗 3 次每次 5min,以盡量洗去轉(zhuǎn)印膜上的 SDS,防止影響后面的抗體結(jié)合。
     2) 按 5g 封閉試劑加 100ml 雙蒸水計(jì),配制膜封閉液,配好的膜封閉液為乳白色懸液,將漂洗過的轉(zhuǎn)印膜,封閉液內(nèi),搖床震動,室溫封閉 30min。用 TBS-T ,PH7.6 洗液,室溫漂洗 3 次每次 5min。
     3) 將 10×抗體稀釋液用雙蒸水稀釋成 1× (10ml 10×抗體稀釋液加入 90ml 雙蒸水, 混勻, 可 4℃保存三個(gè)月) 。此稀釋液可作為一抗和二抗的稀釋液。
     4) 用 1×的抗體稀釋液稀釋抗體。根據(jù)用量以及一抗的推薦稀釋濃度來稀釋一抗。將雜交膜放入雜交袋中,加入一抗工作液,封口,4℃孵育或 37℃搖動孵育 2h。此用過的抗體一般可回收第二天再使用一次。注:如果所加一抗不同,可在此步將膜沿電泳方向剪成條,分別作好標(biāo)記,分開孵育。
     5) 用 TBS-T ,PH7.6 洗液,室溫漂洗 3 次每次 5min。
     6) 用稀釋好的抗體稀釋液稀釋抗體。根據(jù)用量,按 10ml 抗體稀釋液加入 10ul HRP 標(biāo)記二抗的比例,配制二抗工作液。將雜交膜放入雜交袋中,加入二抗工作液,封口, 37℃搖動孵育 1h。此用過的抗體一般可回收第二天再使用一次。
    7) 用 TBS-T ,PH7.6 洗液,室溫漂洗 3 次每次 10min。
    8) 配制 DAB 顯色:根據(jù)用量,取 TBS-T 4ml,加入 DAB 顯色液 A、DAB 顯色液 B 各 200ul,混勻,加在膜正面,室溫下顯色。在目標(biāo)條帶顯出后,而且背景未出時(shí),放入水中終止顯色。


注意事項(xiàng):
    1. 請根據(jù)一抗來源選擇試劑盒。
    2. western blotting DAB 顯色法操作簡單, 但其敏感性與 ECL 發(fā)光發(fā)有一定的差距, 一般只適用于豐度較高的蛋白。
    3. 可以根據(jù)顯色結(jié)果來優(yōu)化實(shí)驗(yàn)反應(yīng)時(shí)間。如背景過深,可延長膜封閉時(shí)間,加長終漂洗次數(shù)與時(shí)間。如果條帶過弱,可延長抗體孵育時(shí)間。
    4. 如果*沒有條帶,請檢查前期蛋白處理及實(shí)驗(yàn)過程, 如果確認(rèn)無誤,反復(fù)兩次依舊無結(jié)果,請換用 ECL發(fā)光法顯色。
    5. TBS-T(0.01M)配制方法:稱取 NaCl 8.5g ,Tris 1.21g ,用 800ml 的雙蒸水溶解,用鹽酸調(diào) PH 到 7.6,再加入 0.5ml Tween-20,用雙蒸水 加 1000ml,混勻即可。 (也可按照自己的配制習(xí)慣來配制)

 

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SW2010 Western blottingECL 化學(xué)發(fā)光法檢測試劑盒

 

Western blotting(小鼠IgG) DAB法顯色試劑盒訂購說明:

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。 
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整,部分城市可到17點(diǎn)整,因超過截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。


運(yùn)輸說明:

1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。

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