目錄:北京索萊寶科技有限公司>>蛋白質研究>>蛋白質電泳>> P1200-25T蛋白質電泳試劑SDS-PAGE凝膠制備試劑盒
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 25T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | P1200 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),石油 |
| 主要用途 | 制膠試劑盒 SDS-PAGE凝膠配制試劑盒 |
蛋白質電泳試劑SDS-PAGE凝膠制備試劑盒
貨號 ：P1200-1/P1200-2
規(guī)格 ：25 塊/50 塊 SDS-PAGE 凝膠
產品內容 ：
| P1200-1 | P1200-2 | 保存條件 | |
| 30%丙烯酰胺(29:1) | 100ml | 100ml×2 | 4℃，避光 |
| 1.5mol/LTris(pH8.8) | 100ml | 100ml×2 | 常溫 |
| 1.0mol/LTris(pH6.8) | 30ml | 60ml | 常溫 |
| 過硫酸銨干粉 | 1g | 2g | 干粉 4℃；溶液-20℃ |
| 10%SDS | 5ml | 10ml | 常溫 |
| TEMED | 0.8ml | 1.5ml | 4℃，避光 |
| 說明書 | 一份 | 一份 |
產品簡介 ：
本公司生產的 SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒是按照經典方法配制而成。本試劑盒提供了配制 SDS-PAGE 凝膠所需的各種試劑，用戶只需自備制膠器具和蒸餾水，即可配制 PAGE 膠。本試劑盒可配制不同規(guī)格、不同聚合度的 PAGE 膠(即聚丙烯酰胺凝膠) 約 25/50 塊。
聚丙烯酰胺凝膠是由單體丙烯酰胺和交聯(lián)劑N,N-甲叉雙丙烯酰胺在加速劑N，N，N，N—四甲基乙二胺(簡稱TEMED)和催化劑過硫酸銨(簡稱AP)或核黃素(即vitamin B2)的作用下聚合交聯(lián)成三維網狀結構的凝膠，以此凝膠為支持物的電泳稱為聚丙烯酰胺凝膠電泳
(polyacrylamide gel electrophoresis，簡稱PAGE)
SDS－PAGE是在要電泳的樣品中加入含有SDS和β-巰基乙醇(或者DTT)的樣品處理液，SDS可以斷開分子內和分子間的氫鍵，破壞蛋白質分子的二級和三級結構，β-巰基乙醇可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵，破壞蛋白質的四級結構。SDS還與蛋白質結合使蛋白質－SDS復合物上帶有大量的負電荷，這時各種蛋白質分子本身的電荷*被SDS掩蓋。這樣電泳時，就消除了各種蛋白質本身電荷及結構上的差異，電泳速度只是與蛋白質分子量有關。用本法測定蛋白質的分子量只需根據待測蛋白質在已知分子量的標準蛋白質圖中的位置，就能得知分子量。
注意事項 ：
1、TEMED 和 10%過硫酸銨后加，在加入前需混勻前面所加試劑。10%過硫酸銨在 4℃有效期為一周；TEMED 易揮發(fā)，使用后請蓋緊瓶蓋。在常溫下膠 30 分鐘內可以凝固，如溫度過低，可放 37℃溫箱凝固。灌完分離膠后，輕輕的加 1ml ddH2O 封上層，膠凝固后可見到分界線。灌濃縮膠前，先傾去水層，再用吸紙吸干。濃縮膠灌好后立刻插入梳子。濃縮膠凝固后，放入電泳液中(讓電泳液漫過加樣孔)，輕輕的撥出梳子，可防加樣孔變形。
2、配制量可按上表等比加減。如果所用膠濃度與上面不同，可自行調整，主要是調整 30%丙烯酰胺的量（需要濃度×總體積/30%） ，后用水補足總體積。
配膠說明 ：
1、先在過硫酸銨干粉中加入蒸餾水或去離子水(每克過硫酸銨需加水 10ml)配置成 10%溶液，將溶液分裝成小體積后凍存于-20℃，制備凝膠時融化后使用，10%過硫酸銨溶液現(xiàn)用現(xiàn)配，4℃有效期 7-30 天。
2、檢測 SDS 溶液是否澄清，若出現(xiàn)絮狀物或沉淀可放 37℃片刻溶解，不影響效果。
3、根據目標蛋白分子量大小，選取凝膠濃度，按下表配制。先配分離膠，再配濃縮膠。
| 分離膠 15% | 分離膠 12% | 分離膠 10% | 分離膠 8% | 濃縮膠 5% | |
| 總體積 | 10ml | 10ml | 10ml | 10ml | 5ml |
| 30%丙烯酰胺(29:1) | 5ml | 4ml | 3.3ml | 2.7ml | 0.83ml |
| 1M Tris-HCl (PH6.8) | 0 | 0 | 0 | 0 | 0.625ml |
| 1.5M TrisHCl(PH8.8) | 2.5ml | 2.5ml | 2.5ml | 2.5ml | 0 |
| 10%SDS | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 50ul |
| 10%過硫酸銨 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 75ul |
| TEMED | 10ul | 10ul | 10ul | 10ul | 7.5ul |
| ddH2O | 2.3ml | 3.3ml | 4.0ml | 4.6ml | 3.42m |
| 佳分離范圍 | 10-40kD | 12-60 kD | 20-80 kD | 30-90kD | — |
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參考文獻：
《Dexmedetomidine attenuates the neurotoxicity of propofol toward primary hippocampal neurons in vitro via Erk1/2/CREB/BDNF signaling pathways》 作者:Youbing Tu, Yubing Liang, Yong Xiao, Jing Lv, Ruicong Guan, Fei Xiao, Yubo Xie, and Qiang Xiao 期刊:Drug Design, Development and Therapy 影響因子:3.486 PMID:30858699
《Long noncoding RNA ENST00000413528 sponges microRNA‐593‐5p to modulate human glioma growth via polo‐like kinase 1》 作者:Ren Zhang，Ruo‐Lun Wei，Wei Du，Li‐Wei Zhang，Tao Du，Ya‐Dong Geng，Xin‐ting Wei 期刊:CNS Neuroscience & Therapeutics 影響因子:4.458 PMID:30924320
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