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制備色譜柱的選擇簡介
色譜分離模式的選擇
對于色譜分離模式的選擇應采用多種分析柱對分離條件進行測試，當有多種模式可以選擇時，應著重考慮下列因素，包括：
分辨率：即色譜填料對被測組分的選擇性
上樣量：即色譜填料對被測樣品的承載容量
分析速度：即對被測樣品的分離時間
色譜柱規格的選擇
下表提供了色譜柱規格選擇的一般規律，在選擇時應考慮下列因素，包括：
① 色譜柱內徑：樣品的上樣要與色譜柱的交叉截面面積相對稱，要選擇色譜柱的內徑要適合于樣品的上樣量。
② 填料的粒徑：越小的粒徑具有越高的柱效，但是價格更高，并且帶來更高的柱壓，要求設備的硬件具備更高的壓力耐受性。在被測組分的色譜峰與其它色譜峰非常靠近時，就需要更高的柱效，此時較小粒徑的色譜填料就顯得非常有用。相反，越大的粒徑則柱效越低，但價格也相對較低，同時對設備的要求也不高。
③ 色譜柱長度：越長的色譜柱具有越高的柱效和更高的樣品承載量，但是柱壓將會更高，同時分離時間可能會更長。
制備柱分離性能測試的步驟
① 考慮到填料由分析級直接放大到制備級的因素，如果要純化大量的化合物，需要考慮分析柱的規格和可作為制備柱的填料粒徑（10µm或更大）；作為在下一步純化產品量更大的項目，必須考慮選擇更大的填料粒徑和更大內徑的色譜柱，在與分析柱相同的填料下對產品進行純化。
② 對分析柱（4.6mm內徑或更小）選擇性的研究，應在多種填料和多種色譜條件下進行選擇，可以采用一些商品的液相色譜條件選擇軟件進行多種色譜模式的比較選擇，這樣可以縮短分離條件選擇的時間。
③ 在得到*的分離條件后，需要對分析柱上樣品的承載量進行測試，比較多種上樣量下產物的純度，選擇產物純度的zui大上樣量。
④ 選擇制備柱的規格，要依據在分析柱上得到的上樣量數據，進行放大分離，通常選擇與分析柱相同粒徑的填料和色譜柱長度來達到推測制備分離的預測。放大制備柱的上樣量應基于制備柱和分析柱的交叉截面面積的比值來進行選擇。
⑤ 檢查制備色譜分離的結果和色譜餾出物的區域以及純度。
