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　　程序降溫盒內異丙醇的量必須高于刻度線；凍存5次后異丙醇需要更換一次，以免影響凍存效果。細胞凍存后應取出一管復蘇，檢測細胞的存活率。理論上細胞可在液氮內長期保存，為穩妥起見可在細胞凍存半年后復蘇培養，觀察細胞生長情況，再繼續凍存。凍存細胞十分脆弱，必須輕柔操作。除少數對冷凍保護劑（DMSO或甘油）敏感的細胞，絕大部分細胞在解凍之后，可直接接種到*培養基中，隔天再換新鮮培養基以去除DMSO 和死細胞，如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼壁的問題，也可因不離心，減少了操作步驟，降低污染的幾率。

 

　　關于程序降溫盒，您不得不知道的這些事兒！

　　程序降溫盒要不要加異丙醇？

　　不需要。利用自身*設計進行降溫：內層金屬合金芯快速降溫-外曾絕緣聚乙烯泡沫隔熱的相互配合達到平衡，實現-1攝氏度/min。不用異丙醇意味著多批次凍存效果沒有差異，且費用低（無需每五次更換異丙醇），無有害廢棄物。同時無需預冷，蓋子不凍粘，當從冰箱里拿出凍存盒時不會凍到手指。

　　當把冷凍樣品從取出保存時，凍存管是否一定要放在干冰上而不是普通的冰上?

　　細胞凍存管從 取出后，必須盡快的轉移到液氮中進行存儲。在液氮存儲之前，如果冰箱距離液氮位置較遠或需要較長時間轉移，為了保持細胞低溫冷凍的狀態，我們推薦將細胞放在-78°C干冰上；若將細胞凍存管放置在普通的冰上，凍存管溫度會顯著升高，降低細胞解凍后的活力和功能。這個問題的答案同樣適用于其它程序降溫盒或凍存方式。

　　循環使用間隔的時間？

　　5-10min。細胞取出放到液氮后，可將金屬合金芯取出，室溫下10min左右就可升到室溫。如需要更快速度，也可以將金屬合金芯放入37度水浴鍋，可在非常短的時間內升溫。在使用前別忘了用酒精擦拭消毒，確保干燥且無菌。