程序降溫盒的使用方法直都搞不明白,覺得是不是應該把程序降溫凍存盒先從-80度移到室溫放一段時間(細胞剛開始還沒凍的時候就是室溫),然后把細胞放進去,再一起移到-80度,這樣才能實現程序降溫呢? 時間使用長了,感覺里面的液體是不是異丙醇啊,使用時間長了會不會揮發或變質什么的,要不要添加或維護一下呢,還有有一只降溫盒因不小心給傾斜讓液體流出了部分,要補充嗎?
程序降溫盒使用經驗分析:
經驗1:凍存盒外表面有刻度的吧,異丙醇液面要高于底線。4a.C*D8Y&P9A,y凍存盒肯定是先放在室溫,然后放進去細胞,置于-80,利用異丙醇實現梯度降溫啊。)根據論壇里的討論,異丙醇使用過一段時間后是要更換的,但是我一直沒換過,也沒發現很大問題。
經驗2:我們實驗室凍存盒平時放4度,需要凍細胞時直接拿出來用就可以了。第二天轉移至液氮,貴重的細胞盡快轉移,不然會影響復蘇成活率的。一般是用5次就更換一下異丙醇。現在也有一些商品化凍存液可以直接丟進-80的,很方便,效果也不錯的。經驗3:異丙醇的量是要保證的,不能低于表明的線,否則不能起到很好的程序性降溫作用,我們是在4度放置,放了細胞后立馬放到-80度冰箱,第二天再轉移到液氮,效果很不錯。異丙醇熔點:-87.9度的色透明具有乙醇氣味的可燃性有毒液體。注意了有可燃性!急性毒性:口服-大鼠LD50:5840毫克/公斤;口服-小鼠LC50:3600毫克/公斤。刺激數據:眼睛-兔子100毫克/!請注意清理!
經驗4:應該不可以把凍存盒放4°的,因為梯度降溫的起始點是室溫20°左右,所以從-80℃拿出來的凍存盒應該現在室溫靜置一段時間待其恢復到室溫再使用。而其中的異丙醇應使用6~7此后更換一次,而且保證液體量達到刻度線,否則降溫效果會受到影響。
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