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制備液相色譜儀的定義及簡述

制備液相色譜儀是一種由儲液瓶、高壓泵、進樣系統、色譜柱、檢測器、廢液瓶六部分組成的儀器。

輸液泵是HPLC系統中zui重要的部件之一。泵的性能好壞直接影響到整個系統的質量和分析結果的可靠性。輸液泵應具備如下性能：①流量穩定，其RSD應＜0.5%，這對定性定量的正確性至關重要；②流量范圍寬，分析型應在0.1~10 ml/min范圍內連續可調，制備型應能達到100 ml/min；③輸出壓力高，一般應能達到150~300 kg/cm2；④液缸容積小；⑤密封性能好，耐腐蝕。

    泵的種類很多，按輸液性質可分為恒壓泵和恒流泵。恒流泵按結構又可分為螺旋注射泵、柱塞往復泵和隔膜往復泵。恒壓泵受柱阻影響，流量不穩定；螺旋泵缸體太大，這兩種泵已被淘汰。目前應用zui多的是柱塞往復泵。

    柱塞往復泵的液缸容積小，可至0.1ml，因此易于清洗和更換活動相，特別適合于再循環和梯度洗脫；改變電機轉速能方便地調節流量，流量不受柱阻影響；泵壓可達400 kg/cm2。其主要缺點是輸出的脈沖性較大，現多采用雙泵系統來克服。雙泵按連接方式可分為并聯式和串聯式，一般說來并聯泵的流量重現性較好（RSD為0.1%左右，串聯泵為0.2~0.3%），但出故障的機會較多（因多一單向閥），價格也較貴。

    早期使用隔膜和停流進樣器，裝在色譜柱進口處。現在大都使用六通進樣閥或自動進樣器。進樣裝置要求：密封性好，死體積小，重復性好，保證中心進樣，進樣時對色譜系統的壓力、流量影響小。HPLC進樣方式可分為：隔膜進樣、停流進樣、閥進樣、自動進樣。

    1．隔膜進樣。用微量注射器將樣品注進專門設計的與色譜柱相連的進樣頭內，可把樣品直接送到柱頭填充床的中心，死體積幾乎即是零，可以獲得*的柱效，且價格便宜，操縱方便。但不能在高壓下使用（如10MPa以上）；此外隔膜輕易吸附樣品產生記憶效應，使進樣重復性只能達到1~2%；加之能耐各種溶劑的橡皮不易找到，常規分析使用受到限制。

    2．停流進樣。可避免在高壓下進樣。但在HPLC中由于隔膜的污染，停泵或重新啟動時往往會出現“鬼峰”；另一缺點是保存時間不準。在以峰的始末信號控制餾分收集的制備色譜中，效果較好。

    3．閥進樣。一般HPLC分析常用六通進樣閥（以美國Rheodyne公司的7725和7725i型zui常見），其關鍵部件由圓形密封墊（轉子）和固定底座（定子）組成。由于閥接頭和連接管死體積的存在，柱效率低于隔膜進樣（約下降5~10%左右），但耐高壓（35~40MPa），進樣量正確，重復性好（0.5%），操縱方便。

    4．自動進樣。用于大量樣品的常規分析。