(1)活    化：

依次向柱中加入10 mL乙酸乙酯、10 mL正己烷，棄去流出液；

(2)上    樣：

再用5 mL正己烷分兩次洗滌旋蒸瓶并加入柱中，棄去流出液；

(3)淋    洗：

依次向柱中加入10 mL正己烷、10 mL10%乙酸乙酯正己烷，棄去流出液；

(4)洗    脫：

向柱中加入20 mL 10%乙酸乙酯正己烷，收集流出液；

(5)重新溶解：

將洗脫液在40 ℃減壓蒸至近干，用甲醇定容至1 mL，供HPLC分析。

色譜柱：

Diamonsil C18(2)，250 mm × 4.6 mm，5 μm（Cat# 99603）

流  速：

1.0 mL/min

檢測器：

UV 264 nm

柱  溫：

30 ℃

進樣量：

20 μL

流動相：

甲醇

目標化合物

維生素D₂

維生素D₃

回收率(%)

84.69

87.42

貨號

名稱

規格

樣品前處理

65358

維生素D2、D3檢測柱

ProElut VDC

2 g/12 mL,20/pk

244358

12管防交叉污染真空SPE萃取裝置

12位

4806

考克(控制流量)

15/pk

99011

真空/正壓兩用泵，無油

1/pk

99013

抽濾瓶套裝

(包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞)

1/pk

37177

針頭式過濾器 Nylon

13 mm,0.22 μm 100/pk

37180

針頭式過濾器 Nylon

13 mm,0.45 μm 100/pk

色譜柱及保護柱

99603

通用型反相液相色譜柱

Diamonsil C18（2）

250 × 4.6 mm, 5 μm

6201

EasyGuard保護柱套裝

1個柱套+2個柱芯

10 × 4.0 mm

標準品

12-N-V17-100MG

維生素D2[50-14-6]

100 mg

12- N-11463-100MG

維生素D3[67-97-0]

100 mg

HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對試劑

50102

甲醇 HPLC級

4 L

50104

乙酸乙酯 HPLC級

4 L

50115

正己烷 HPLC級

4 L

50119

二甲基亞砜 HPLC級

4 L

50123

甲基叔丁基醚 HPLC級

4 L

通用色譜產品

52401B

瓶架/藍色

50 孔

52401A

瓶架/白色

50孔

5323

樣品瓶（棕色/螺紋）

2 mL, 100/pk

5325

樣品瓶蓋/含墊（已經組裝）

100/pk

H80465

HPLC 進樣針

25 μL