Diol二醇基色譜柱的應用與保養知識
Diol二醇基色譜柱在正相系的分析中,可以獲得高于色譜柱的保留容量。且由于其化學鍵合了與硅膠有著不同性質的羥基,因此在正相分析下,其填充劑的選擇范圍相對更大采用了化學處理技術,從而實現了穩定的化學修飾。為此,其同樣可以放心地使用于正相制備HPLC中。此外,與硅膠有所不同的是,由于它可以通入水洗提液,因此能夠較容易地清洗掉吸附于色譜柱上的極性雜質成分。
它主要應用于可用于多肽,蛋白,以及極性藥物分子等的分離,該色譜柱具有應用特點為:超純全多孔球形硅膠提高了色譜柱分離的穩定性并具有良好的對稱峰形和高柱效;以*的表面修飾方法確保硅膠表面的惰性,均一性,和重現性;優良的批與批和柱與柱間的重現性。對于分離多肽,蛋白,以及極性藥物分子等無疑是一個較佳的選擇。
Diol二醇基色譜柱的保養知識:
pH避免在pH低于2或高于9的條件下使用。較高的pH會溶解硅膠,從而使部分或全部的氰丙基鏈從硅膠表面脫落,引起分離效率的降低和保留時間的改變。為了獲得很好的分離效果和延長柱的使用壽命,請盡量使用pH在2-8范圍內的流動相。
壓力盡管它可在高至5000psi的壓力下使用,但正常的操作壓力應當低于3000psi。長時間在高壓下運行會損壞色譜柱和輸液泵。由于壓力來源于流速,因此流速將受制于系統所能承受的壓力。一般而言,柱壓會隨著色譜柱使用時間的增加而逐漸增加。壓力突然增加預示色譜柱入口端的篩板發生了堵塞。在這種情況下,建議將色譜柱反接后用適宜的溶劑進行沖洗。
溫度操作溫度為60攝氏度。長時間在高溫下操作也會損壞色譜柱,這種情形在高的pH條件下特別突出。
儲藏長期不用時,請不要讓水或緩沖液存留在色譜柱中。在替代緩沖液時,請用至少20-30倍柱體積的50%甲醇(或乙腈)水溶液沖洗色譜柱,再用20-30倍柱體積的純有機溶劑如乙腈等進行沖洗。每根色譜柱在運輸過程中均會附有兩個可拆卸的堵頭。為了防止柱床干涸,請用堵頭塞緊色譜柱的兩端。