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薄層色譜法（四）展開
點擊次數(shù)：4591 發(fā)布時間：2022-4-6
那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡單介紹一下關(guān)于薄層色譜法（四）展開：
展開
展開劑也稱溶劑系統(tǒng)，流動性或洗脫劑，是在平面色譜中用作流動相的液體。展開劑的主要任務(wù)是溶解被分離的物質(zhì)，在吸附劑薄層上轉(zhuǎn)移被分離物質(zhì)，使各組分的Rf值在0.2~0.8之間并對被分離物質(zhì)要有適當(dāng)?shù)倪x擇性。作為展開劑的溶劑應(yīng)滿足以下要求:適當(dāng)?shù)募兌取⑦m當(dāng)?shù)姆€(wěn)定性、低黏度 、線性分配等溫線、很低或很高的蒸氣壓以及盡可能低的毒性。
展開方式總的來講平面色譜的展開有線性、環(huán)形及向心3種幾何形式。
A 單次展開 用同一種展開劑一個方向展開一次，這種方式在平面色譜中應(yīng)用*為廣泛。(垂直上行展開，垂直下行展開，一向水平展開，對向水平展開)
B 多次展開 單向?qū)Υ苏归_，用相同的展開劑沿同一方向進(jìn)行相同距離的重復(fù)展開，直至分離滿意，廣泛應(yīng)用于薄層色譜法
C 雙向展開 用于成分較多、性質(zhì)比較接近的難分離組分的分離。
薄層展開室需預(yù)先用展開劑飽和，可在室中加入足夠量的展開劑，并在壁上貼二條與室一樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開劑中，密封室頂?shù)纳w，使系統(tǒng)平衡或按正文規(guī)定操作。將點好樣品的薄層板放入展開室的展開劑中，浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5~1.0cm(切勿將樣點浸入展開劑中)，密封室蓋，待展開至規(guī)定距離(一般為10~15cm)，取出薄層板，晾干，按各品種項下的規(guī)定檢測。
影響展開的因素
A 相對濕度的影響
B溶劑蒸汽的影響(a 展開室的飽和b預(yù)吸附)
C 溫度的影響
D 展距的影響與分離度僅正比與展距的平方根。
折疊顯色
A 光學(xué)檢出法
a自然光(400~800nm)
b紫外光(254nm或365nm)
c熒光一些化合物吸收了較短波長的光，在瞬間發(fā)射出比照射光波長更長的光，而在紙或薄層上顯出不同顏色的熒光斑點(靈敏度高、專屬性高)
B 蒸汽顯色法顯色
多數(shù)有機(jī)化合物吸附碘蒸氣后顯示不同程度的黃褐色斑點，這種反應(yīng)有可逆及不可逆兩種情況，前者在離開碘蒸氣后，黃褐色斑點逐漸消退，并且不會改變化合物的性質(zhì)，且靈敏度也很高，故是定位時常用的方法;后者是由于化合物被碘蒸氣氧化、脫氫增強(qiáng)了共軛體系，因此在紫外光下可以發(fā)出強(qiáng)烈而穩(wěn)定的熒光，對定性及定量都非常有利，但是制備薄層時要注意被分離的化合物是否改變了原來的性質(zhì)。
C 物理顯色法
用紫外照射分離后的紙或薄層后，使化合物產(chǎn)生光加成，光分解、光氧化還原及光異構(gòu)等光化學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致物質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生某些變化，如形成熒光發(fā)射功能團(tuán)。發(fā)生熒光增強(qiáng)或淬滅及熒光物質(zhì)的激發(fā)或發(fā)射波長發(fā)生移動等現(xiàn)象，從而提高了分析的靈敏度和選擇性。
D 試劑顯色法
廣泛應(yīng)用的定位方法。用于紙色譜的顯色劑一般都適用于薄層色譜，還有防腐劑的顯色劑不適合用于紙色譜及含有有機(jī)黏合劑薄層的顯色，又時噴顯色劑后續(xù)加熱，這也不是用于紙色譜。
顯色方法a噴霧顯色:顯色劑溶液以氣溶膠的形式均勻的噴灑在紙和薄層。b 浸漬顯色:揮去展開劑的薄層板，垂直的插入盛有展開劑的浸漬槽中，設(shè)定浸板及抽出速度和規(guī)定在顯色劑中浸漬的時間。
顯色試劑
a 通用顯色劑硫酸溶液(硫酸:水 1:1，硫酸:乙醇1:1)、0.5%碘的氯fang溶液、中性0.05%高錳shuan鉀溶液、堿性高錳shuan鉀溶液(還原性化合物在淡紅色背景上顯黃色斑點)
b 專屬顯色劑
⑸測定比移值
在一定的色譜條件下，特定化合物的Rf值是一個常數(shù)，因此有可能根據(jù)化合物的Rf值鑒定化合物。
⑹ 薄層掃描
薄層掃描法指用一定波長的光照射在經(jīng)薄層層析后的層析板上，對具有吸收或能產(chǎn)生熒光的層析斑點進(jìn)行掃描，用反射法或透射法測定吸收的強(qiáng)度，以檢測層析譜。對于中成藥復(fù)方制劑，亦可用相應(yīng)的原藥材按需要組合作陰、陽對照，然后比較其薄層掃描圖譜加以鑒別。使用儀器為薄層掃描儀。
如需用薄層掃描儀對色譜斑點作掃描檢出，或直接在薄層上對色譜斑點作掃描定量，則可用薄層掃描法。薄層掃描的方法，除另有規(guī)定外，可根據(jù)各種薄層掃描儀的結(jié)構(gòu)特點及使用說明，結(jié)合具體情況，選擇吸收法或熒光法，用雙波長或單波長掃描。由于影響薄層掃描結(jié)果的因素很多，故應(yīng)在保證供試品的斑點在一定濃度范圍內(nèi)呈線性的情況下，將供試品與對照品在同一塊薄層上展開后掃描，進(jìn)行比較并計算定量，以減少誤差。各種供試品，只有得到分離度和重現(xiàn)性好的薄層色譜，才能獲得滿意的結(jié)果。
以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于薄層色譜法（四）展開。
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