分子熒光分光光度計如何測測定維生素B2含量?
閱讀:2107 發布時間:2020-9-25
分子熒光分光光度計具有性能穩定,使用方便等特點,能夠輕松滿足對熒光樣品進行定性、定量分析的需求。*光學設計使儀器結構更加緊湊,從而占用更小的實驗臺面積。支持單機和聯機兩種操作模式。基于Microsoft Windows的控制及分析軟件的簡潔易用,可輕松地進行參數設置、數據采集和數據處理。
任何熒光物質都具有激發光譜和發射光譜,發射波長總是大于激發波長。熒光激發光譜是通過測定熒光體的發光通量隨波長變化而獲得的光譜,反映不同波長激發光引起熒光的相對效率。熒光發射光譜是當熒光物質在固定的激發光源照射后所產生的分子熒光,是熒光強度對發射波長的關系曲線,表示在所發射的熒光中各種波長相對強度。由于各種不同的熒光物質有它們各自特定的熒光發射波長,可用它來鑒定熒光物質。有些發熒光的物質其熒光強度與物質的濃度成正比,故可用熒光分光光度法測定其含量。
分子熒光分光光度計對維生素含量的定性分析:
1.移取5ml維生素B2標準溶液于25ml容量瓶中,用0.5mol/LHAc稀釋至刻度,搖勻,放入石英吸收池中。在700V電壓中,在450nm—600 nm范圍內掃描標準溶液的發射光譜,通過譜圖的分析,確定其佳熒光發射峰波長(522nm)。
2.設熒光發射峰為步驟1獲得的熒光發射峰波長,在350nm—500 nm范圍內掃描標準溶液的激發光譜,確定其佳熒光激發峰波長(371nm)。
3.將上面獲得的激發波長為激發波長,掃描名物質的熒光光譜,觀察所得到的光譜與上面得到光譜的異同。
分子熒光分光光度計對維生素含量的定量分析:
1.標準曲線制作:準確取1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml維生素B2標準溶液于5個25ml容量瓶中,用0.5mol/LHAc稀釋至刻度,搖勻,在激發波長371nm,熒光波長522nm處測定熒光強度,以濃度對熒光強度繪制標準曲線。
2.維生素B2含量測定:取2.0ml維生素B2待測溶液于25ml容量瓶中,用0.5mol/LHAc稀釋至刻度,搖勻;在激發波長371nm,熒光波長522nm處測定熒光強度,根據標準曲線計算維生素B2含量。