亚洲中文久久精品无码WW16,亚洲国产精品久久久久爰色欲,人人妻人人澡人人爽欧美一区九九,亚洲码欧美码一区二区三区

上海易佰聚經貿有限公司
中級會員 | 第15年

13636495876

無內毒素質粒中量提取試劑盒 詳細資料

時間:2013-1-6閱讀:1441
分享:

 佰易聚生物商城提供的分子生物學試劑和試劑盒、美國聯合碳化和美國光譜醫學透析袋、培養基和培養耗材、細胞因子和細胞分離液、抗體和elisa試劑盒及常用生物試劑等,大量現貨火爆*,歡迎登錄www.ebioeasy.com或者,,洽談選購!

 

英文名稱:EndoFree plasmid ezFilter midi kit     

中文名稱 :無內毒素質粒中量提取試劑盒

編號:PD1416-01

規格:  10次

品牌:biomiga

說明 :

從15~50 mL菌液中純化200 μg無內毒素質粒DNA

試劑盒組分:
 
Catalog #
PD1416-01
Preps
10
EzBindTM Columns
10
Filter syringe (25 mL)
10
Buffer A1
30 mL
Buffer B1
30 mL
Buffer N3
40 mL
Buffer KB
35 mL
EndoClean  Buffer
10 mL
RNase A (20 mg/mL)
3 mg(150 μL)
Endofree Elution Buffer
15 mL
User Manual
1
 
保存條件:
 
RNAse A在4℃下可以保存一年,Buffer A1加入RNase A 后4℃保存,其它組分室溫保存。
 
注意事項:
  1. 質??截悢担杭兓械涂截惖馁|粒時,使用2倍的菌液體積,2倍的Buffer A1,B1,N3,100%乙醇,相同體積的70% 乙醇和Endofree Elution Buffer..
  2. 轉化菌: 若為-70oC甘油凍存的菌,請先涂布平板培養后,再重新挑選新的單個菌落進行培養。切勿直接取凍存在4oC的菌進行培養。
  3. 柱結合能力:250 μg。
  4. 對富含內源核酸酶的宿主菌(endA+)如HB101, JM101, TG1等,需去核酸酶,請使用產品PD1712。
操作簡明步驟:
  1. 取50 µL新鮮的菌液接種到15-50 mL (勿超過 50 mL)的LB培養基(含適量抗生素),37oC震蕩培養14-16小時。室溫下5,000 x g離心10分鐘,收集菌體,并盡可能的吸去上清。
  2. 加入2.5 mL Buffer A1(確保已加入RNase A),用移液器或渦流震蕩確保細菌沉淀重新懸浮。
  3. 加入 2.5 mL Buffer B1, 輕輕地反轉5-10 次以混合均勻,然后靜置2-5分鐘至溶液粘稠而澄清。 
  4. 加入600 µL Buffer N3, 立即反轉5次,用手用力搖晃3-5次充分混勻,此時出現白色絮狀沉淀。
  5. 將裂解液轉移至過濾器中,放在一個15 mL的試管上靜置10分鐘。管中的白色絮狀沉淀浮上來,對準15 mL的管向下壓,使裂解液盡可能多的通過,有些裂解液可能會殘留在沉淀中。注:靜置10 分鐘時RNase A將工作,排除RNA污染。
  6. 定量吸取離心后的上清液至新的15 mL管中(避免吸起沉淀),加入0.1 倍體積的EndoClean Buffer,混勻后冰浴10分鐘,其間不時搖勻(若EndoClean Buffer粘稠難吸,可將槍頭剪掉頭后再吸?。?/font>
  7. 室溫下(冰浴取出后務必使溶液溫度恢復到23oC以上,否則溶液不分層)13,000 x g離心10分鐘(也可在2,500 x g離心15 min)。此時溶液分為兩層,上層水相含有質粒,下層紅色有機相含有內毒素。
  8. 將上層水相轉移至一個新的15 mL管中,加入3 mL 的Buffer N3及3 mL的100% ethonal,用手用力甩5次以混勻,該混合溶液需要需馬上進行過柱吸附操作。
  9. 立即轉移6.0 mL裂解液至帶收集管的DNA柱中,室溫下> 2,500 x g 離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將離心柱重新放回到收集管中。重復此步直至所有的溶液通過DNA柱。
  10. 可選: 向DNA柱中加入 3.0 mL Buffer KB, 室溫下> 2,500 x g 離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將離心柱重新放回到收集管中。
  11. 向離心柱中加入5 mL 70% 乙醇,室溫下> 2,500 x g離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將離心柱重新放回到收集管中。重復步驟“11”。
  12. 將離心柱放回高速離心機中,室溫下> 2,500 x g開蓋離心10分鐘,以*去除殘留的乙醇。
  13. 將離心柱轉至一個新的15 mL離心管中,向DNA柱膜的正中加入0.5 mL的Endofree Elution Buffer,室溫放置1分鐘,> 2,500 x g 離心5分鐘,以洗脫質粒DNA。若想提高得率,可用洗脫得到的0.5 mL的Endofree Elution Buffer。 再洗脫一次,收集到新的離心管中。

操作流程:

           

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
撥打電話
在線留言