北京西美杰科技有限公司
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參考價 | 面議 |
- 型號 a7089
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更新時間:2015-12-16 17:32:36瀏覽次數:1110
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Nature Methods推薦PCR污染清除試劑DNA-ExitusPlus
聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction)簡稱PCR,是一種選擇性體外擴增核酸片段的方法,經過循環復制,擴增產量是指數上升,所以具有*的靈敏度,被廣泛應用于生物和醫學的科研,臨床各種研究中,是目前應用的分子生物學方法之一。
Nature Methods推薦PCR污染清除試劑DNA-ExitusPlus由于PCR具有*的靈敏度,微量的核酸污染便會導致假陽性擴增結果而導致實驗結果不準確,這也是廣大實驗者zui頭痛的問題,如果形成氣溶膠污染擴散,則可引起整個PCR實驗室的污染,處理起來非常棘手,嚴重的甚至要關閉實驗室。環境中的核酸是主要的污染源,常見的污染源有:
1. 模板提取時真空抽干裝置;
2. 超凈臺;
3. 電泳裝置;
4. 紫外分析儀;
5. 剪刀、鑷子、刀片、移液器等器械;
6. 離心機;
7. 冰箱門把手,冷凍架,門把手或實驗臺面等;
8. 氣溶膠;
9. 高壓滅菌裝置;
傳統的PCR污染清除方法主要有:稀酸處理法、紫外照射法、尿嘧啶糖苷酶(UNG)法、酶解變性、酒精沉淀等幾種方式,但仍然存在無法*破壞DNA分子、試劑具有腐蝕性或者毒性、小片段核酸無法清除等不足。
方式 | 原理 | 不足 |
修飾 | 標記遺傳物質,阻止聚合酶與核酸的結合,從而抑制DNA擴增。 | 這種標記均為可逆反應,一旦發生去修飾反應即可被聚合酶結合;試劑可能具有腐蝕性。 |
酶解 | 酶可將長鏈的核酸分子降解成小片段。 | 降解的核酸中仍有大片段存在,具有完整的遺傳信息,可通過PCR擴增出完整的片段。 |
高壓變性 | 高壓可將核酸降解成20~30bp的小片段。 | 僅適用于耐高壓材料,更無法應用實驗操作臺和大型的實驗設備。 |
紫外照射 | PCR產物中嘧啶堿基會形成二聚體,延伸終止, | 僅對500bp以上長片段有效,對短片段效果不大,且并不是DNA鏈中所有嘧啶均能形成二聚體,且UV照射還可使二聚體斷裂 |
德國AppliChem*研發的DNA-ExitusPlus是一種無腐蝕、無致癌性的核酸污染清除溶液,該產品可將裸露的核酸*降解至無法作為擴增模板的小片段,無法被擴增,且無法恢復,從而*消除了PCR過程中由于環境污染而導致的假陽性擴增。
特點:
1. 產品為非酶類試劑;
2. 產品中各組分協同作用,快速、非序列特異性的降解核酸污染;
3. 所有組分可生物降解、無毒無害;
4. 不含有機溶劑或者揮發性物質,不含無機酸或者堿性物質,不會對金屬形成腐蝕;
5. 使用簡單,噴灑或浸泡處理15分鐘即可完成清除作用;
6. 升溫至50度可提高反應速度。
?產品參數:
性狀:無色或者淺黃色液體
保存溫度:常溫
運輸溫度:常溫
效期:12個月
?產品信息
貨號 | 品名 | 用途 | 規格 |
A7089 | DNA-ExitusPlusTM | 環境中核酸污染清除 | 250ml/500ml/1L/2.5L |
A7409 | DNA-ExitusPlusTM IF (indicator free) | 250ml/500ml/1L/2.5L | |
A8740 | Derma-ExitusPlusTM | 處理手,手臂,手套等 | 250ml |
A7600 | Autoclave-ExitusPlus? | 高壓滅菌裝置中核酸污染清除 | 6x 1 L |
?使用方法:
1. 實驗操作臺表面
直接將DNA-ExitusPlusTM噴到操作臺表面作用10~15分鐘,無菌濕布擦拭后即可,無需用水沖洗;
2. 儀器表面
用布或紙巾蘸取適量 DNAExitusPlusTM擦拭儀器表面,充分作用后再用干凈濕布擦一遍即可。一些小的部件可在DNA-ExitusPlusTM中浸泡10min左右,然后用清水沖洗、晾干;
3. 塑料及玻璃器皿
向容器中加入足量的DNA-ExitusPlusTM,搖晃以確保器皿內壁全部接觸到溶液,充分作用后棄去溶液晾干,用蒸餾水沖洗干凈晾干即可;
4. 移液器
遵照移液器說明拆取移液器的管嘴連件,于DNA-ExitusPlusTM中浸泡1min,然后用清水沖洗干凈晾干便可安裝到移液器上;
5. 解剖刀、鑷子等實驗器材
先用蘸有DNA-ExitusPlusTM的布擦拭一遍,然后將鑷子等器材于DNA-ExitusPlusTM中浸泡10min以上,也可通過加熱到50~60℃縮短處理時間;
6. 手臂、手套等
直接將Derma-ExitusPlus(A8740對準手臂或手套進行噴霧至全部濕潤,作用3~4min即可)。
此產品與方法已得到雜志與科研工作者的認可:
(1) Esser, K.-H. et al. (2006) DNA decontamination: DNA-ExitusPlus in comparison with conventional reagents. Nature Methods 3, 151
(2) Arena, A. (2010) DNA exitus plus™ versus standard bleach solution for the removal of dna contaminants on work surfaces and tools. Investigative sciences journal 2, 20-29
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