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核酸提取和純化,對檢測結果的影響
早在公元前2-3世紀,中國和印度就有了關于病毒所導致的疾病---天花的記錄,直到19世紀末,病毒才開始逐漸被發現和鑒定。目前,對于NCP疫情的檢測,使用體外診斷核酸檢測方法仍是*的手段。
核酸是分子生物學的基礎,而核酸提取是核酸檢測,乃至于整個分子行業繞不過去的門檻,很多時候一份樣本的核酸提取的好壞直接決定了檢測結果的有效性。
核酸提取的主要步驟:
01裂解細胞
去除與核酸結合的蛋白質以及多糖、脂類等生物大分子,去除其他不需要的核酸分子,如提取DNA分子時,應去除RNA,反之亦然。
02沉淀核酸
純化核酸,去除鹽類,有機劑等雜質,一般可以把核酸提取方式主要分為三類:溶液型抽提,柱式抽提,磁珠純化法。
隨著基因檢測、個性化給藥等普及,生物行業各個領域都追求高通量、高純度的今天,磁珠法純化提取核酸的優勢更加明顯 磁珠技術作為是運用較為廣泛的核酸提取方式。磁珠法與PCR法聯合使用,在高效提取核酸的同時,使氣溶膠污染概率大大降低,能有效防止實驗容易出現假陽性的問題。
說到磁珠法,那我們首先當然必須得了解磁珠,什么是磁珠呢?磁珠是利用一定的組織包被四氧化三鐵核心而形成的可以被磁鐵吸附的同時有能通過表面包被物吸附(結合)核酸的神奇的小珠子。
▲ 磁珠法核酸提取原理示意圖
磁珠法是通過裂解液裂解細胞組織樣本,從樣本中游離出來的核酸分子被特異的吸附到磁性顆粒表面,蛋白質等雜質不被吸附而留在溶液中。利用磁棒吸附攜帶核酸的磁珠移動至不同的試劑槽內,通過反復快速攪拌、混勻液體,經過細胞裂解、核酸吸附、洗滌與洗脫等步驟,終得到純凈的核酸。核酸純化的方法是影響所提取核酸質量的重要因素,只有高質量的核酸才能滿足下游的各種應用。
如何獲得更優質的核酸提取結果?
除了選擇合適的提取方式,嚴謹的實驗操作之外,無菌、高品質的實驗室小耗材也值得精心挑選!SP Bel-Art為DNA/RNA濃縮純化過程提供必要的工具,保證提取核酸的質量。
01研磨組織相關產品
ProCulture微量均質器-手持式
快速處理一對多樣品的理想選擇,配套的塑料研棒無DNase,RNase。
液氮冷卻微型研缽和研杵套件
通過在微型離心管中均勻化來保護樣品質量,減少樣品損耗和采集時間。
02核酸提取相關產品
磁珠分離架
可拆卸套管,更有效地傳輸液體;50ml和15/5ml型號的獨立管套使液體的添加和去除更容易;不同規格可供選擇:1.5ml至50ml型號的管套上的彈簧柱塞允許珠子沿管壁以不同高度分離;
Flowmi™細胞過濾器
過濾原代培養物時盡量減少樣品損失,使用方便防止污染。
ProCulture®軌道振動平臺
把你的攪拌器變成軌道搖床。
ProCulture®37°C恒溫板
在培養箱外保持理想的細胞溫度。培養皿在培養箱外放置更長時間;保護細胞活力;減少細胞壓力,使胰蛋白酶等酶有效地發揮作用。
ProCulture®-1°C冷凍控制器
易于使用,可控制冷凍速度,大約每分鐘-1°C;適用于1.0/1.8ml的試管,18位。
03核酸純化相關產品
PrepSafe微型離心管微型浮動架
在工作臺上工作,在水浴中漂浮;離心管被緊密地固定,確保不會彈出;將支架的支腿壓在工作臺上,可松開管子,便于拆卸;開放式支架使試管與水接觸多,以便更好地控制樣品的溫度。
關于SP Bel-Art
SP Bel-Art隸屬于SP Scientific集團,公司坐落于美國新澤西州,自1946年創立以來,開發,開創了實驗室使用塑料設備的先河,生產制造的實驗室設備和耗材廣泛應用于制藥、生命科學、生物技術、教育、食品、醫療保健和石化等行業,現有產品超過10,000種,為客戶提供全面的選擇,產品廣泛銷往美洲、歐洲、亞洲、非洲、澳洲等多個國家和地區。Bel-Art產品經過反復的實踐檢驗,以高質量的標準為廣大用戶提供多方位的產品和技術服務。作為SP旗下的一個成員,Bel-Art致力于為客戶提供更多創新性、更有價值的產品。
SP Bel-Art主打產品
細胞過濾器
保存小體積樣品,避免流式細胞儀堵塞
安瓿瓶開瓶器
杜絕試劑污染,安全方便開啟安瓿瓶
無菌取樣工具
FD*別適用于生物制藥行業,伽馬射線滅菌,無需進行昂貴的清潔驗證
生物危害處理
高壓滅菌處理生物危害垃圾
干燥器
款式豐富,合理化實驗室空間
磁力攪拌子
種類繁多,適用于各種攪拌實驗
常用管架
試管架、離心管架等
溫度計
涵蓋各種玻璃液體、電子和雙金屬溫度計
比重計
波美計、密度比重計、酒精比重計等
試劑瓶
帶GHS標簽的安全洗瓶、試劑瓶等
移液器和附件
各種款式移液產品
生命科學相關產品
磁珠分離架、96孔PCR板、研磨器、克隆環等
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