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氨基酸分析前處理中的小幫手

時間:2021/8/9閱讀:1036
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                                                     獎牌榜
                                              2020東京 Olympic




近日讓人熱血的話題莫過于2020東京 Olympic,北京時間8月8日,東京 Olympic的全部比賽已宣告結束,終獎牌榜也出爐了。本屆比賽,中國以38金的數量位于金牌榜第二,太棒了祖國的運動健兒們,為你們感到無比驕傲!


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 Olympic對于運動員而言,可謂是十年磨一劍,每一位都要經歷日復一日的刻苦訓練。在大量運動后,運動員需要及時補充和平衡在運動中損失的能量,而氨基酸能為機體和大腦提供能量,尤其對于運動員而言,身體對于能量的需求遠遠高于常人。今天我們帶來的小科普就是關于氨基酸分析。



想要得到滿意的氨基酸分析結果——樣品前處理是關鍵!



在食品、動物飼料檢測或者新藥研發的過程中,研究員需要對蛋白質樣品中的氨基酸種類及含量進行測定;要得到滿意的氨基酸分析結果,不僅僅要注意樣品的制備,更重要的是樣品的處理。為了讓蛋白質樣品能分解成氨基酸便于后續檢測,一般需要對樣品進行水解處理。水解方法一般有三種,即酸水解,氧化水解和堿水解,其中,為常用的是酸水解法。


酸水解法步驟


1.稱取少量含蛋白質的樣品于安瓿管中(切勿粘壁)

2.加入6mol/L HCL,定容,加入phenol

3.液氮冷凍,抽真空,融化安瓿管使其密封

4.3110℃,水解12/24/36/72h

5.水解后,冷卻、混勻、開管、過濾,定容至50ml

6.取0.5ml濾液至濃縮儀中,60℃真空離心干燥,必要時加少許水,重復蒸干1-2次

7.加入樣品稀釋液,震蕩混勻,過濾,供上機測定使用


英國GeneVac——溶劑蒸發工作站


EZ-2系列、HT系列耐酸型號則非常適合氨基酸前處理,氨基酸的前處理需要蛋白質通常用6N HCl水解,這個濃度的鹽酸對傳統的蒸發系統有很強的腐蝕作用,但是耐酸型號的GeneVac系統的內腔,轉子和氣體管路全部帶PTFE涂層,可以輕松處理6N以上鹽酸的濃縮。


其次,批處理量大,1.5ml樣品一次可處理64個,效率高;無需氮氣,冷阱回收酸蒸汽,防止污染,無后期成本。


因此,和傳統的氮吹或旋蒸相比,新型GeneVac溶劑蒸發工作站的優勢是采用抽真空,離心的方式進行樣品濃縮,Dri-Pure這樣的關鍵技術可以保證樣品安全快速濃縮而且防爆沸,另可使樣品富集,增加樣品回收率。

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高效濃縮、安全防爆沸


耐酸型號可處理6N 以上鹽酸;

批量處理樣品:一次可以處理幾百個樣品,加快研發效率;

Dri-Pure,有效防止樣品暴沸,免于交叉污染;

處理高沸點溶劑:可處理 DMF、DMSO沸點較高的溶劑,處理溶劑的沸點可高達220℃;

樣品自動轉移功能:利用SampleGenie™技術直接干燥后的樣品自動轉移到樣品瓶中儲存或進行后續上機分析,無需二次轉移;


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