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可見分光光度計(jì)五個重要組成部分
光源
對光源的基本要求是:應(yīng)在儀器操作所需的光譜區(qū)域內(nèi)能夠發(fā)射連續(xù)輻射;有足夠的輻射強(qiáng)度和良好的穩(wěn)定性,而且輻射能量隨波長的變化應(yīng)盡可能小。紫外-可見分光光度計(jì)中常用的光源有熱輻射光源和氣體放電光源兩類。熱輻射光源用于可見光區(qū)。如鎢絲燈和鹵鎢燈;氣體放電光掉用于紫外光區(qū),如氫燈和氘燈。
鎢燈和碘鎢燈可使用的范圍在340~2500nm,這類光源的輻射能量與施加的外加電壓有關(guān),在可見光區(qū),輻射的能量與工作電壓的4次方成正比。光電流也與燈絲電壓的n次方(n>l)成正比。因此必須嚴(yán)格控制燈絲電壓,儀器必須備有穩(wěn)壓裝置。
在近紫外區(qū)測定時常用氫燈和氘燈,它們可在160~375nm范圍內(nèi)產(chǎn)生連續(xù)光源。氘燈的燈管內(nèi)充有氫的同位素氘,它是紫外光區(qū)應(yīng)用zui廣泛的一種光源,其光譜分布與氫燈類似,但光強(qiáng)度比相同功率的氫燈要大3~5倍。
單色器
單色器是能從光源輻射的復(fù)合光中分出單色光的光學(xué)裝置,其主要功能應(yīng)該是能夠產(chǎn)生光譜純度高且波長在紫外可見區(qū)域內(nèi)任意可調(diào)的單色光。單色器一般由入射狹縫、準(zhǔn)直鏡(透鏡或凹面反射鏡使入射光成平行光)、色散元件、聚焦元件和出射狹縫等幾部分組成。其核心部分是色教元件,起分光的作用。單色器的性能直接影響人射光的單色性,從而也影響到測定的靈敏度、選擇性及校準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系等。
能起分光作用的色散元件主要是棱鏡和光柵。棱鏡常用的材料有玻璃和石英兩種。它們的色散原理是依據(jù)不同波長光通過棱鏡時有不同的折射率而將不同波長的光分開。由于玻璃可吸收紫外光,所以玻璃棱鏡只能用于350~3200nm的波長范圍,即只能用于可見光區(qū)域內(nèi)。石英棱鏡適用的波長范圍較寬,可從185~4000nm,即可用于紫外、可見、近紅外三個光域。
光柵是利用光的衍射與干涉原理制成的。它可用于紫外、可見及近紅外光域,而且在整個波長區(qū)具有良好的、幾乎均勻一致的分辨能力。它具有色散波長范圍寬、分辨本領(lǐng)高、成本低、便于保存和易于制備等優(yōu)點(diǎn)。缺點(diǎn)是各級光譜會重疊而產(chǎn)生干擾。
入射、出射狹縫,透鏡及準(zhǔn)直鏡等光學(xué)元件中狹縫在決定單色器性能上起重要作用。狹縫的大小直接影響單色光純度,但過小的狹縫又會減弱光強(qiáng)。
吸收池
吸收池用于盛放分析試樣,一般有石英和玻璃材料兩種。石英池適用于可見光區(qū)及紫外光區(qū),玻璃吸收池只能用于可見光區(qū)。為減少光的反射損失,吸收池的光學(xué)面必須*垂直于光束方向.在高精度的分析測定中(紫外區(qū)尤其重要),吸收池要挑選配對。因?yàn)槲粘夭牧系谋旧砦馓卣饕约拔粘氐墓獬涕L度的精度等對分析結(jié)果都有影響。
檢測器
檢測器的功能是檢測光信號、測量單色光透過溶液后光強(qiáng)度變化的一種裝置,常用的檢測器有光電池、光電管和光電倍增管等。它們通過光電效應(yīng)將照射到檢測器上的光信號轉(zhuǎn)變成電信號。對檢測器的要求是:在測定的光譜范圍內(nèi)具有高的靈敏度;對輻射能量的響應(yīng)時間短,線性關(guān)系好;對不同彼長的輻射響應(yīng)均相同,且可靠;噪音低,穩(wěn)定性好等。
硒光電池對光的敏感范圍為300~800nm,其中又以500~600nmzui為靈敏。這種光電池的特點(diǎn)是能產(chǎn)生可直接推動微安表或檢流計(jì)的光電流,但由于容易出現(xiàn)疲勞效應(yīng)而只能用于低檔的分光光度計(jì)中。
光電管在紫外-可見分光光度計(jì)上應(yīng)用較為廣泛。它的結(jié)構(gòu)是以一彎成半圓柱形的金屬片為陰極,陰極的內(nèi)表面涂有光敏層,在圓柱形的中心置一金屬絲為陽極.接受陰極釋放出的電子。兩電極密封于玻璃或石英管內(nèi)并抽成真空。陰極上光敏材料不同,光譜的靈敏區(qū)也不同。可分為藍(lán)敏和紅敏兩種光電管,前者是在鎳陰極表面上沉積銻和艷,可用于波長范困為210~625nm;后者是在陰極表面上沉積了銀和氧化艷。可用范圍為625~1000nm。與光電池比較,它有靈敏度高、光敏范圍寬、不易疲勞等優(yōu)點(diǎn)。
光電倍增管是檢測微弱光zui常用的光電元件,它的靈敏度比一般的光電管要高200倍,因此可使用較窄的單色器狹縫,從而對光譜的精細(xì)結(jié)構(gòu)有較好的分辨能力。
信號指示系統(tǒng)
它的作用是放大信號并以適當(dāng)方式指示或記錄下來。早期常用的信號指示裝置有直讀檢流計(jì)、電位調(diào)節(jié)指零裝置以及數(shù)字顯示或自動紀(jì)錄裝置等。現(xiàn)在很多型號的分光光度計(jì)都可配套計(jì)算機(jī)使用,一方面可對分光光度計(jì)進(jìn)行操作控制,另一方面可進(jìn)行數(shù)據(jù)處埋。