上海美析儀器有限公司
超氧化物岐化酶(SOD)的應用方案
檢測樣品:酶
檢測項目:活性
方案概述:SOD是含金屬輔基的酶。高等植物含有兩種類型的SOD:Mn-SOD和Cu.Zn-SOD,它們都催化下列反應:由于超氧自由基(02)為不穩定自由基,壽命極短,測定SOD活性一般為間接方法。并利用各種呈色反應來測定SOD的活力。核黃素在有氧條件下能產生超氧自由基負離子02-..-,當加入NBT后,在光照條件下,與超氧自由基反應生成單甲躦(黃色),繼而還原生成二甲躦……
引言:
SOD是含金屬輔基的酶。高等植物含有兩種類型的SOD:Mn-SOD和Cu.Zn-SOD,它們都催化下列反應:由于超氧自由基(02)為不穩定自由基,壽命極短,測定SOD活性一般為間接方法。并利用各種呈色反應來測定SOD的活力。核黃素在有氧條件下能產生超氧自由基負離子02-..-,當加入NBT后,在光照條件下,與超氧自由基反應生成單甲躦(黃色),繼而還原生成二甲躦,它是一種藍色物質,在560nm波長下有最大吸收。當加入SOD時,可以使超氧自由基與H結合生成H2O2和02,從而抑制了NBT光還原的進行,使藍色二甲攢生成速度減慢。通過在反應液中加入不同量的SOD酶液,光照--定時間后測定560nm波長下各液光密度值,抑制NBT光還原相對百分率與酶活性在一定范圍內呈正比。反應液藍色愈深,說明酶活性愈低。
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