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產(chǎn)品分類：核酸電泳

儲(chǔ)存條件：室溫,24個(gè)月

用途：主要用于RNA電泳

注意事項(xiàng)：主要由MOPS、乙酸鈉、EDTA組成,溶解于DEPC水中。

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

孤島鹽單胞菌二甲基化組蛋白H3K4抗體Human SCN4B ELISA Kit類人猿

海南小短桿菌二甲基化組蛋白H3K9抗體Human SDCCAG10 ELISA Kit類人猿免疫球蛋白G4(IgG4)免疫試劑盒

梾木生殼針孢基化組蛋白H3抗體Human SEC23IP ELISA Kit類人猿巨噬集落激因子(M-CSF)免疫試劑盒

植物乳桿菌植物亞種乙酰化組蛋白H3抗體Human VTCN1(V-set domain-containing T-cell activation inhibitor 1) ELISA Kit類人猿降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌乙酰化組蛋白H3抗體Human SEC24C ELISA Kit類人猿降鈣(CT)免疫試劑盒

燼灰紅鏈霉菌果糖發(fā)酵亞種磷化肝核因子4α抗體Human SEC24A ELISA Kit類人猿黃體生成(LH)免疫試劑盒

賴芽胞桿菌屬高遷移率核小體結(jié)合蛋白1Human SEC31A ELISA Kit類人猿骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)免疫試劑盒

根瘤菌磷化組蛋白H3抗體Human SDR39U1 ELISA Kit蝌蚪

木蹄層孔菌組織相容性復(fù)合體α抗體Human SEC5/EXOC2 ELISA Kit蝌蚪睪(T)免疫試劑盒

黑木耳肝生長(zhǎng)因子激活抑制蛋白2抗體Human SEC61alpha ELISA Kit蝌蚪雌二(E2)免疫試劑盒

植物乳桿菌HOMER2抗體Human SDR42E1 ELISA Kit蝌蚪γ基丁(GABA)免疫試劑盒

蟲類神食酵母瘤病調(diào)控因子1抗體（鋅指蛋白395）Human SDCCAG8 ELISA Kit鯨

桔橙小單孢菌人類狀瘤病18 E6單克抗體Human SCN4B ELISA Kit鯨孕激/孕(PROG)免疫試劑盒

白鵝膏菌（不可訂購(gòu)）異質(zhì)核糖核蛋白F抗體Human SDCCAG10 ELISA Kit鯨狀腺原(T3)免疫試劑盒

沃氏富鹽菌異質(zhì)核糖核蛋白K抗體Human SCNM1 ELISA Kit鯨皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒

相思根瘤菌異質(zhì)核糖核蛋白L抗體Human SCNN1A ELISA Kit鯨甲狀腺(T4)免疫試劑盒

: N144資源名稱: 大腸埃希氏菌 質(zhì)量規(guī)格：1.0 M in toluene常春藤皂苷元

黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品D-松

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品
MOPS電泳緩沖粉劑CTGF ELISA Kit  大鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子規(guī)格： 48T

AsAb ELISA Kit  大鼠抗規(guī)格： 48T

PTH ELISA Kit   大鼠jia狀旁腺激su規(guī)格： 48T

HIS ELISA Kit  大鼠組an規(guī)格： 48T

IL-13 ELISA KIT  大鼠白介su13規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。