白喉棒狀桿菌毒素ELISA檢測試劑盒

棒狀桿菌是一種不規則形狀的需氧非芽孢形成的革蘭氏陽性桿狀體(0.5-1µm厚，長2-6µm)。它們包括皮膚共生體、機會病原體和幾種主要病原體，包括白喉棒狀桿菌。一般來說，它們是從含有亞碲酸鹽的選擇性培養基上的咽拭子中分離出來的。由白喉梭菌引起的細菌感染有兩種形式。呼吸性白喉通常是由產毒素（產毒）毒株引起的；皮膚疾病可由產毒或非產毒菌株引起。在呼吸道形式的疾病中，形成一種膜；這種膜通常在喉部或扁桃體上可見。當細胞膜阻塞呼吸時，人可能會死于窒息。其他并發癥是由白喉毒素（心肌炎，神經麻痹）的遠程作用引起的。皮膚白喉通常是輕微的，通常由非明顯的潰瘍或淺層潰瘍組成，很少涉及毒性并發癥（1-2%的產毒菌株感染）。白喉是疫苗接種前時期兒童死亡的最常見原因之一。自從大多數工業化國家引進白喉類毒素疫苗（福爾馬林滅活白喉毒素）并廣泛使用以來，這種疾病現在的特點是散發病例和低強度的間歇性暴發。但是，最近在一些東歐國家的白喉流行再次引起人們對這種被遺忘的“疾病”的注意，而且，這些病例大多數發生在青少年和成人中，而不是兒童。控制白喉的有效方法是通過預防性的白喉類毒素免疫。類毒素抗體可防止毒素的作用；經免疫接種的人可被產生毒素的白喉菌株感染，但不會出現白喉的系統性表現。通過早期、適當的治療，可以改善疾病的結果。及時識別該疾病對于確保早期、適當的白喉抗毒素治療很重要。

【檢測原理】

特異性抗體的定量免疫酶學測定是基于ELISA（酶聯免疫吸附試驗）技術。微孔板上包被特定的抗原，以結合樣本的相應抗體。洗滌微孔以去除所有未結合的樣本材料后，添加酶聯物，與捕獲的抗體結合。在第二個洗滌步驟中，未結合的共軛物被去除。通過加入四甲基聯苯胺(TMB)底物，得到藍色反應產物，可以觀察到結合結合物形成的免疫復合物。該產品的強度與樣本中特異性抗體的數量成正比。加入終止液以終止反應，藍色變成了黃色。使用酶標儀器讀取450/620nm處的吸光度。

【試劑盒組成】

1）微孔板              12x8，包被白喉棒狀桿菌毒素（類毒素）抗原

2）樣本稀釋液          1×100ml，磷酸鹽緩沖液（10mM），pH 7.2 ± 0.2，即用型

3）終止液              1×15ml，硫酸，0.2mol/L，即用型

4）洗滌濃縮液          20倍濃縮，磷酸鹽緩沖液（0.2M），1×50ml，pH 7.2 ± 0.2

5）酶聯物              1×20ml，過氧化物酶標記的人IgG抗體，即用型

6）底物液              1×15ml，3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺（TMB），即用型

7）標準品       4x2ml，即用型（標準品按照“第一個白喉抗毒素人體IgG國際標準”進行校準）

標準品A           0.000 IU/mL   藍蓋

標準品B           0.015 IU/mL   綠蓋

標準品C           0.075 IU/mL   黃蓋

標準品D           0.150 IU/mL   紅蓋

8）封板紙             1x

9）使用說明書         1x

【所需的材料和設備】（未提供）

1）酶標儀

2）37℃培養箱

3）手動或自動洗板裝置

4）移液器：10-1000µL

5）渦旋混合器

6）蒸餾水

7）一次性試管

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