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Nav1.7-GFP HEK293細胞系

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武漢艾美捷科技有限公司(AmyJet Scientific Inc),簡稱艾美捷科技(AmyJet Scientific)。2010年底成立于九省通衢的湖北省武漢市,歷經五年多的發展,已成為國內的集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術服務與合約開發為一體的專業化高科技生物企業。艾美捷科技總部設在武漢市洪山區光谷大道35號光谷總部二期時代1號樓13層,業務覆蓋全國。


艾美捷科技有限公司?


艾美捷科技與國內外優秀的生物試劑供應商保持著密切的合作關系,目前已成為眾多的中國總代理或一級代理,主要包括:Merck Millipore、Origene、AAT Bioquest、ABGENT、 Cayman Chemical、Abnova 、Biovision、ProSpec、Hycult Biotech 、Equitech-Bio、Trevigen、Alomone Labs、Epigentek、Abbkine、ImmunoReagents 、Jackson、SouthernBiotech、US Biological 、VIVA Bioscience 、Caisson Labs等,可以在*時間為用戶提供Z前沿的專業資訊、完備的產品及物流服務。

艾美捷科技有限公司



隨著公司業務的壯大,為了更好的服務客戶,公司組建了一支在生物領域經驗豐富的研發團隊-艾美捷生物技術中心,宣布進入自主研發階段,以期將更多更優質的產品*給國內生物領域的同仁。相信在不久的將來,將陸續有印有艾美捷Logo的產品與大家見面,并逐漸受到大家的認可!

 

艾美捷科技有限公司



專業的技術力量使我們能夠為廣大用戶提供強大的技術支持,深厚的人脈資源使我們在全國主要城市擁有眾多合作伙伴,艾美捷科技非常榮幸能將世界上*的生物產品*給國內從事生物學領域科研的老師和同仁,配備的優秀銷售隊伍以及專業的技術支持,隨時為客戶提供技術咨詢和售后服務。
作為專業性的產品供應公司,公司出資儲備了大量現貨;作為產品研發公司,公司必將不遺余力,努力向專業化、化標準邁進,打造科技與服務并存型企業!


誠摯邀請各位供應商、經銷商、老師們蒞臨艾美捷科技參觀、指導!

 

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供貨周期 現貨 應用領域 化工,生物產業

穩定重組HEK293細胞系,工程化設計用于多X環素誘導表達人類Nav1.7(Genbank #Q15858),在C末端融合綠色熒光蛋白[激發約395 nm,475 nm;發射約510 nm],并帶有C末端鏈球菌素結合肽(SBP)融合。Nav1.7是一種河T毒素敏感的電壓門控鈉通道IX亞型α亞基(SCN9A)。


Nav1.7是一種電壓門控鈉離子通道,由人類SCN9A基因編碼。它通常在兩種類型的神經元中高水平表達:背根神經節和三叉神經節的傷害感受神經元,以及交感神經節神經元,這些是自主(不自主)神經系統的一部分。

Nav1.7存在于痛覺感覺神經末梢,即傷害感受器附近,接近沖動發起區域。Nav1.7通道產生快速激活和失活的電流,對河T毒素水平敏感。缺乏傷害感受器中Nav1.7的敲除小鼠顯示出對炎癥性疼痛反應減少[1]。


作為BPS Bioscience在中國的區域總代理,艾美捷科技強烈推薦BPS Bioscience熱銷產品Nav1.7-GFP HEK293 細胞系產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。

產品名稱貨號詳情

Nav1.7-GFP HEK293 細胞系

BPS-60507查看


應用

? 藥物化合物篩選

? 功能測定


細胞培養協議

細胞解凍

1. 在37°C水浴中搖晃裝有冷凍細胞的小瓶大約60秒。細胞解凍后(可能比60秒稍快或稍慢),迅速將小瓶的全部內容轉移到含有10 ml預熱的解凍培養基4(無Blasticidin或Zeocin)的試管中。在37°C水浴中放置細胞過久將導致活性迅速喪失。

2. 立即以300 x g的速度離心細胞5分鐘,去除培養基并將細胞在5 ml預熱的解凍培養基4(無Blasticidin或Zeocin)中重懸。

3. 將重懸的細胞轉移到T25或T75培養瓶中,并在37°C、5% CO2培養箱中培養。

4. 培養24小時后,檢查細胞附著和活性。更換培養基為新鮮的解凍培養基4(無Blasticidin或Zeocin),并繼續在37°C、5% CO2培養箱中培養,直到細胞準備好傳代。

5. 細胞應在w全融合前傳代。在s次傳代及后續傳代中,使用生長培養基4A(含Blasticidin和Zeocin)。


細胞傳代

1. 抽去培養基,用磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗細胞,并用0.05% Y酶/EDTA從培養容器中分離細胞。

2. 一旦細胞分離,加入生長培養基4A并轉移到試管中。以300 x g的速度離心細胞5分鐘,去除培養基并將細胞在不含Blasticidin和Zeocin的生長培養基4A中重懸。按照每周1:10至1:15的期望亞培養比例,將細胞種入新的培養容器中。


細胞冷凍

1. 抽去培養基,用磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗細胞,并用0.05% Y酶/EDTA從培養容器中分離細胞。

2. 一旦細胞分離,加入生長培養基4A并計數細胞。

3. 以300 x g的速度離心細胞5分鐘,去除培養基并將細胞在4°C冷凍培養基(BPS Bioscience #79796,或10% DMSO + 90% FBS)中重懸,細胞濃度約為2 x 10^6個細胞/ml。

4. 將1 ml的細胞懸浮液分裝到冷凍小瓶中。將小瓶放入保溫容器中緩慢冷卻,并在-80°C下保存過夜。

5. 次日將小瓶轉移到液氮中保存。

注意:建議在早期傳代時擴增細胞并至少冷凍10個小瓶以備將來使用。


目標蛋白表達的誘導

為了表達Nav1.7,細胞在收獲或測定前24小時用DMEM/F12 50/50補充10% FBS、1%青M素/鏈M素、1 ?g/ml多X環素(Biochemika #44577)和3 mM丁酸鈉(Acros Organics #263190250)誘導。

Nav1.7-GFP HEK293細胞系

圖1. 表達Nav1.7的細胞的Western Blot。

使用抗鈉通道Nav1.7,克隆N68/6(Millipore #MABN41)染色的HEK293 Nav1.7細胞的Western Blot,隨后使用堿性磷酸酶偶聯的抗小鼠IgG(Rockland Immunochemicals #610-1502)。M:分子量標記。


文獻參考:

1. Catterall, W.A. Cell and Developmental Biology 16: 521–555 (2000).

2. Choi, J.S., et al. Neurology 67:1563-1567 (2006).

3. Li, Y., el al. Protein Science 20 (1): 140–149 (2011).


BPS Bioscience是一家通過ISO 9001:2015認證的生命科學領域的供應商,公司一直致力于開發藥物研發領域的重組蛋白酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選試劑盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年創立,從創立至今一直致力于提供藥物研發領域的創新解決方案,以推動新的藥物發現。公司主要關注的領域包括免疫療法、表觀遺傳學、CRISPR、細胞信號轉導等,主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 


作為BPS Bioscience在中國的區域代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BPS Bioscience以及客戶訂制化服務。



Nav1.7-GFP HEK293細胞系Nav1.7-GFP HEK293細胞系



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