IL-4/IL-13響應型STAT6熒光素酶報告基因
- 公司名稱 武漢艾美捷科技有限公司
- 品牌 BPS Bioscience
- 型號
- 產地
- 廠商性質 代理商
- 更新時間 2024/12/26 13:22:34
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供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 化工,生物產業 |
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IL-4/IL-13響應型STAT6熒光素酶報告基因HEK293細胞系是一種穩定整合了受STAT6響應元件控制的螢火蟲熒光素酶報告基因和人類STAT6(信號轉導及轉錄激活因子6)的HEK293細胞系,形成了一個w全功能的STAT6信號通路。該細胞系已通過人類IL-4(白細胞介素-4)和IL-13(白細胞介素-13)的激活實驗以及使用抗IL-4R和抗IL-13R拮抗劑進行了驗證。
背景
轉錄因子STAT6(信號轉導及轉錄激活因子6)在免疫細胞中扮演著至關重要的角色。IL-4激活的STAT6信號對于Th2分化和免疫球蛋白類別轉換是必需的,它還介導巨噬細胞中炎癥增強子的直接抑制。STAT6參與過敏性炎癥疾病的多個方面,如氣道高反應性、嗜酸性粒細胞浸潤和肥大細胞反應。STAT6主要被IL-4和相關的IL-13激活,它們具有重疊的生物學特性。當IL-4和IL-13結合時,由IL-4Ralpha和IL-13Ralpha1組成的受體復合物激活與受體相關的Janus激酶(JAK1和Tyk2),從而導致STAT6的激活。激活的STAT6形成同源二聚體,轉移到細胞核中,在那里它們結合響應基因的啟動子,誘導基因轉錄。盡管這兩種細胞因子都激活STAT6信號,但已證明IL-4在啟動這一信號通路方面比IL-13更有效。STAT6通路的功能障礙會導致過敏反應(哮喘、特應性皮炎、食物過敏)和癌癥(霍奇金病、中樞神經系統和濾泡性淋巴瘤)。STAT6可以作為診斷和預后工具。抑制劑已被證明可以減少動物模型中的急性炎癥,未來的發展可能會導致新的針對STAT6相關病理的治療工具。
作為BPS Bioscience在中國的區域總代理,艾美捷科技強烈推薦BPS Bioscience熱銷產品IL-4/IL-13 響應型 STAT6 熒光素酶報告基因 HEK293 細胞系。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
產品名稱 | 貨號 | 詳情 |
IL-4/IL-13 響應型 STAT6 熒光素酶報告基因 HEK293 細胞系 | BPS-78941 | 查看 |
應用
? 篩選和表征STAT6信號通路的激活劑或抑制劑。
? 篩選抗IL-4、抗IL-4R、抗IL-13或抗IL-13R抗體。
細胞解凍
1. 在37°C水浴中搖晃裝有冷凍細胞的小瓶大約60秒。細胞解凍后(可能比60秒稍快或稍慢),迅速將小瓶的全部內容轉移到含有10 ml預熱的解凍培養基1的試管中。
注意:在37°C水浴中放置細胞過久將導致活性迅速喪失。
2. 立即以300 x g的速度離心細胞5分鐘,去除培養基并將細胞在5 ml預熱的解凍培養基1中重懸。
3. 將重懸的細胞轉移到T25或T75培養瓶中,并在37°C、5% CO2培養箱中培養。
4. 培養24小時后,檢查細胞附著和活性。更換培養基為新鮮的解凍培養基1,并繼續在37°C、5% CO2培養箱中培養,直到細胞準備好傳代。
5. 細胞應在w全融合前傳代。在s次傳代及后續傳代中,使用生長培養基1M。
細胞傳代
1. 抽去培養基,用無Ca2+/Mg2+的磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗細胞,并用0.05% y酶/EDTA從培養容器中分離細胞。
2. 一旦細胞分離,加入生長培養基1M并轉移到試管中。
3. 以300 x g的速度離心細胞5分鐘,去除培養基并將細胞在生長培養基1M中重懸。
4. 按照推薦的亞培養比例1:5至1:10,每周一次或兩次將細胞種入新的培養容器中。
注意:解凍后和細胞密度低時,細胞可能生長速度較慢。在這些情況下,建議以1/4的比例分離細胞。經過幾次傳代后,細胞生長速度加快,可以使用更高的比例分離細胞。
細胞冷凍
1. 抽去培養基,用無Ca2+/Mg2+的PBS沖洗細胞,并用0.05% y酶/EDTA從培養容器中分離細胞。
2. 一旦細胞分離,加入生長培養基1M并計數細胞。
3. 以300 x g的速度離心細胞5分鐘,去除培養基并將細胞在4°C冷凍培養基(BPS Bioscience #79796)中重懸,細胞濃度約為2 x 10^6個細胞/ml。
4. 將1 ml的細胞懸浮液分裝到每個冷凍小瓶中。將小瓶放入保溫容器中緩慢冷卻,并在-80°C下保存過夜。
5. 次日將小瓶轉移到液氮中長期保存。
注意:建議在早期傳代時擴增細胞并至少冷凍10個小瓶以備將來使用。
圖1:IL-4/IL-13響應型STAT6熒光素酶報告基因HEK293細胞系對人類IL-4和IL-13的反應。
IL-4/IL-13響應型STAT6熒光素酶報告基因HEK293細胞與不同濃度的人類IL-4(左圖)和IL-13(右圖)共培養6小時。使用ONE-Step?熒光素酶檢測系統測量熒光素酶活性。結果以STAT6熒光素酶報告基因表達的誘導倍數顯示,與無激動劑的細胞活性相對比。
文獻參考:
Kasaian MT., et al., 2013. Am J Respir Cell Mol Biol. 49(1):37-46.
Czimmerer Z., et al., 2018. Immunity 48(1):75-90.e6.
BPS Bioscience是一家通過ISO 9001:2015認證的生命科學領域的供應商,公司一直致力于開發藥物研發領域的重組蛋白酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選試劑盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年創立,從創立至今一直致力于提供藥物研發領域的創新解決方案,以推動新的藥物發現。公司主要關注的領域包括免疫療法、表觀遺傳學、CRISPR、細胞信號轉導等,主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。
作為BPS Bioscience在中國的區域代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BPS Bioscience以及客戶訂制化服務。
IL-4/IL-13響應型STAT6熒光素酶報告基因 IL-4/IL-13響應型STAT6熒光素酶報告基因