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化工儀器網>產品展廳>試劑標物>常用實驗試劑>普通試劑>FS1166 JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒

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FS1166 JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒

參考價 840
訂貨量 ≥100assays
具體成交價以合同協議為準

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上海復申生物科技有限公司(FUSHENBIO)是一家專注從事生物、化學試劑及其試劑盒的高新技術企業;主要以熒光探針,分子探針,核酸/蛋白質標記、細胞檢測等技術和產品為研發核心,產品廣泛應用于基因合成、細胞檢測、活體示蹤,抗體標記、新藥篩選等領域。復申生物(FUSHENBIO)服務全國各地的眾多高校及科研單位、衛生檢驗檢疫部門、環境保護部門、藥企、食品、化工,CRO公司等用戶建立了長期穩定的合作關系;
產品涉及免疫學、細胞生物學、
分子生物學、細菌學、遺傳學、生物化學、蛋白質學、細胞治療等領域。
產品線具體產品線包括:
免 疫 學:內參、二抗、成套免疫組化試劑盒相關試劑;
細胞生物學:細胞凋亡/轉染、血清、培養基、細胞培養、熒光探針等相關試劑;
分子生物學:Marker、核酸提取、PCR及RT-PCR、DIG標記檢測等相關試劑;
檢測試劑盒:ELISA檢測試劑盒、放免檢測試劑盒、生化檢測試劑盒;
常用生化試劑: 氨基酸、蛋白質、碳水化合物、抗生素、維生素、染料等。
定制服務:醫藥中間體,分子砌塊路線設計開發等
主要代理品牌有:Affinity Biosciences(國產磷酸化抗體品牌)、美國ZYMO RESEARCH(甲基化,樣本提取純化膠回收試劑盒)、HUABIO華安生物(兔單抗).
2018年江蘇分公成立(南京安賽利生物科技有限公司
江蘇分公司地址:南京市大橋北路37號金都匯廣場3棟1702-1703室  
 
公司理念  
 
誠信勤勉、上等服務、高效、專業。  
 
1.訂貨周期短。根本不同客戶需求,我公司會在短時間為您提供所需產品。  
2.價格實惠。一次購買產品多的客戶,可享受更優惠的折扣及贈品。  
3.售后保障。我們承諾對每售出的一件產品,提供售前、售后服務。      
4.我公司是國內專業化的生物技術產品銷售和技術服務的公司,依托中國生命科學院和復旦大學的高效穩定技術平臺,有著一批專業的銷售團隊和技術人員。公司的每一位員工都會熱情的為您服務。




主要以熒光探針,分子探針,核酸/蛋白質標記、細胞檢測等技術和產品為研發核心,產品廣泛應用于基因合成、細胞檢測、活體示蹤,抗體標記、新藥篩選等領域。

供貨周期 現貨 規格 100T
貨號 FS1166 應用領域 化工,生物產業,農業
主要用途 檢測細胞、組織或純化線粒體膜電位變化的試劑盒

產品簡介

JC-1 線粒體膜電位檢測試劑盒JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit)是一種以JC-1為熒光探針,快速且靈敏的檢測細胞、組織或純化線粒體膜電位變化的試劑盒。因線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標志性事件。因此本試劑盒可用于早期的細胞凋亡檢測。

JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位Ψm 位的理想熒光探針。JC-1染料以電勢依賴性的方式積聚在線粒體內,可以用來檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。正常線粒體內,JC-1聚集在線粒體基質中形成聚合物,聚合物發出強烈的紅色熒光(Ex=585 nm, Em=590 nm);不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失,JC-1 只能以單體的形式存在于胞漿中,產生綠色熒光(Ex=514 nm, Em=529 nm)。JC-1 不僅可用于定性檢測,因顏色的變化可以非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。也可以用于定量檢測,因線粒體的去極化程度可以通過紅/綠熒光強度的比例來衡量。

產品組成

 

編號

組分名稱

規格

保存方法

FS1166-A

JC-1200×

5×100μl

-20℃避光,避免反復凍融

FS1166-B

JC-1 染色緩沖液(

80ml

-20℃或 4

FS1166-C

超純水

90ml

-20℃或 4

FS1166-D

CCCP10mM

20μl

-20

說明書

保存及運輸-20℃避光干燥保存,至少1年有效。運輸:冰袋運輸

使用方法 JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒

1. JC-1 染色工作液制備

對于六孔板,本試劑盒可檢測100個樣品。每孔所需JC-1染色工作液的量為1ml,其他培養器皿的 JC-1染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每 50100萬細胞需 0.5mL JC-1 染色工作液。 取適量 JC-1200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋 JC-1。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1。然后再加入 2mL JC-1 染色緩沖液(),混勻后即為 JC-1 染色工作液。

【注意】:必須先把 JC-1200×)用超純水(試劑盒提供)充分溶解混勻后,才可加入 JC-1 染色緩沖液()。不可先配制 JC-1 染色緩沖液()再加入 JC-1200×),這樣 JC-1 會很難充分溶解,會嚴重影響后續的檢測。

2. 陽性對照的設置

CCCP10mM)推薦按 11000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至 10μM,處理細胞 20min。隨后按照下述方法裝載 JC-1,進行線粒體膜電位的檢測。 對于大多數細胞,通常 10μM CCCP 處理 20 min 后線粒體的膜電位會wanquan喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經 JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能

有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。

3. 對于懸浮細胞

1)取1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。

2)加入0.5mL JC-1染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37℃孵育 20min

3)孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的 JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。

437℃孵育結束后,600×g4℃離心 34min 沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。

5)用 JC-1 染色緩沖液()洗滌 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600×g4℃離心 34min沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600×g4℃離心 34min 沉淀細胞,棄上清。

6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光 光度計檢測或流式細胞儀分析。

4. 對于貼壁細胞

【注意】:對于貼壁細胞,如果希望采用熒光分光光度計或流式細胞儀檢測,可以先收集細胞,重懸后參考懸浮細胞的方法進行檢測。

1)對于六孔板的一個孔,吸除培養液,根據具體實驗如有必要可用 PBS 或其它適當溶液洗滌細胞一次,加入 1mL 細胞培養液。細胞培養液中可以含有血清和酚紅。

2)加入 1mL JC-1 染色工作液,充分混勻。細胞培養箱中 37℃孵育 20min

3)孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的 JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。

437℃孵育結束后,吸除上清,用 JC-1 染色緩沖液()洗滌 次。

5)加入 2mL 細胞培養液,培養液中可以含有血清和酚紅。

6)熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡下觀察。

5. 對于純化的線粒體

1)將配制好的 JC-1 染色工作液再用 JC-1 染色緩沖液()稀釋 倍。

20.9mL 5 倍稀釋的 JC-1 染色工作液中加入 0.1mL 總蛋白量為 10100μg 純化的線粒體。

3)用熒光分光光度計或熒光酶標儀檢測:混勻后直接用熒光分光光度計進行時間掃描(time scan),激發波長為485nm,發射波長為 590nm。如果使用熒光酶標儀,激發波長不能設置為 485nm 時,可在475520nm范圍內設置激發波長。另外,也可以參考下面步驟 中的波長設置進行熒光檢測。

4)用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察:方法同下面的步驟 6

6. 熒光觀測和結果分析

檢測 JC-1 單體時可以把激發光設置為 490nm,發射光設置為 530nm;檢測 JC-1 聚合物時,可以把激發光設置為 525nm,發射光設置為 590nm。

【注1:此處測定熒光時不必把激發光和發射光設置在最大激發波長和最大發射波長。如使用熒光顯微鏡觀察,檢測 JC-1 聚合物時可使用常來檢測碘化丙啶或者 Cy3 用的標準帶通濾波器。檢測 JC-1 單體可使用常來檢測 FITC  GFP 的標準帶通濾波器。出現綠色熒光說明線粒體膜電位下降,并且該細胞很可能處于細胞凋亡早期。出現紅色熒光說明線粒體膜電位比較正常,細胞的狀態也比較正常。

注意事項

1JC-1200×)在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內,可以 2025℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。

2)裝載完 JC-1 后用 JC-1 染色緩沖液()洗滌時,使 JC-1 染色緩沖液()保持 4℃左右,此時洗滌效果較好。

3JC-1 探針裝載完并洗滌后盡量在 30min 內完成后續檢測。在檢測前需冰浴保存。

4)請勿把JC-1染色緩沖液()全部配制成JC-1染色緩沖液(,本試劑盒使用過程中需直接使用JC-1 染色緩沖液()。

5)如果發現 JC-1 染色緩沖液()中有沉淀,必須全部溶解后才能使用,可在 37℃加熱促進溶解。

6CCCP 為線粒體電子傳遞鏈抑制劑,有毒,請注意小心防護。

7)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

相關產品

產品貨號

產品名稱

規格

FS1164

JC-1 (5 mg/ml in DMSO) 線粒體膜電位熒光探針(5 mg/ml in DMSO

200μl (1mg)

FS1165

JC-1 線粒體膜電位熒光探針

1mg

FS1166

JC-1 線粒體膜電位檢測試劑盒

100T

FS1167

JC-10 (2mg/ml in DMSO) 線粒體膜電位熒光探針(2mg/ml in DMSO

500ul

FS1169

JC-10 線粒體膜電位檢測試劑盒

100T

FS1179

CCCP (50 mM) 凋亡誘導劑/質子載體

100ul

FS1180

FCCP (50 mM) 凋亡誘導劑/質子載體

100ul



JC-1JC-1部分引用文獻 JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒

(1) [IF=9.7]Contribution of ferroptosis and GPX4’s dual functions to osteoarthritis progression-EBioMedicine Published:January 27, 2022 DOI:https://doi.org/10.1016/j.ebiom.2022.103847

JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒

此圖的原始數據出自文獻(1)中。

(2) [IF=11.4]VDR regulates mitochondrial function as a protective mechanism against renal tubular cell injury in diabetic rats.  -Redox Biology -Volume 70, April 2024, 103062.V

JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒

 

此圖的原始數據出自文獻(2)中。

(3)[IF=11.1]LONP1 targets HMGCS2 to protect mitochondrial function and attenuate chronic kidney disease-EMBO Mol Med(2023)15: e16581 https://doi.org/10.15252/emmm.202216581

JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒

                                             免疫熒光共定位分析mPTC(上,標尺:20um)和人腎組織(下,標尺:200um)中LONP1、HMGCS2和線粒體。

 

 此圖的原始數據出自文獻(3)中。




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