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蛋白 A/G 磁珠

MCE 國際站：Protein A/G Magnetic Beads

品牌：MedChemExpress (MCE)

貨號：HY-K0202

中文名稱：蛋白 A/G 磁珠

存儲條件：4°C，2年請勿離心、干燥或冷凍磁珠。

產品活性：蛋白 A/G 磁珠為 IP、Co-IP 和 ChIP 實驗提供了一種快速便捷的方法。

生物活性：蛋白 A/G 磁珠提供了一種利用親和結合進行蛋白質磁分離的快速而方便的方法。MCE 蛋白質 A/G 磁珠通常用于從血清、細胞培養上清或腹水中分離抗體，以及從細胞或組織提取物中免疫沉淀和共免疫沉淀抗原。 產品優勢 1. 免疫沉淀時只需少量磁珠。 2. 方便省時。 3. 非特異性結合率低。 4. 樣品損失少。 5. 蛋白質結合能力高達 0.7 mg/mL。 6. 穩定。

操作流程：1. 抗原樣品制備根據不同的樣品選擇合適的處理方法2. 磁珠預處理2.1 充分重懸磁珠.2.2 取 25-50 μL 蛋白質 A/G 磁珠轉移到 1.5 mL EP 管中（用量量可根據需要調整）。2.3 加入 400 μL 結合/洗滌緩沖液，充分重懸磁珠。將 EP 管放入磁力架上，磁性分離。棄上清液。重復此步驟 2 次。3. 抗體與磁珠結合3.1 使用結合/洗滌緩沖液將抗體稀釋至終濃度為 5-50 μg/mL 。3.2 將稀釋好的 400 μL 抗體加入步驟 2 處理好的磁珠中，充分混懸，置于翻轉混合儀孵育 (室溫，30 mins；4°C，2 hours)。3.3 磁性分離，收集磁珠，上清液收集于新的 EP 管中，以備后續使用。3.4 加入 400 μL 結合/洗滌緩沖液，充分混懸磁珠，磁性分離，棄上清；重復洗滌 4 次。4. 抗原與抗體-磁珠復合物結合4.1：加入 400 μL 抗原樣品準備的抗原樣品，充分混懸，置于翻轉混合儀孵育 (室溫，30 mins；4°C，2 hours) ，磁性分離，棄上清。4.2 加入 400 μL 結合/洗滌緩沖液 充分重懸磁珠，磁性分離，棄上清；重復洗滌 4 次。5. 抗原洗脫本說明書提供以下兩種抗原洗脫方案，操作者可根據后期檢測的需要選擇不同的抗原洗脫方法。a. 變性洗脫法：此方法洗脫的樣品適用于 SDS-PAGE 檢測。步驟：分離磁珠，棄上清，向磁珠中加入 25-50 μL 1×SDS-PAGE Loading Buffer 混合均勻，95°C 加熱 5 mins。分離磁珠，收集上清，進行 SDS-PAGE檢測。b. 非變性洗脫法：此方法洗脫的樣品保持原有的生物活性，可用于后期功能分析。步驟：分離磁珠，棄上清，向磁珠中加入 25-50 μL 洗脫緩沖液，室溫孵育 10 mins；分離磁珠，收集上清至新的 EP 管，并立即滴入總體積 1/10 體積的中和緩沖液 (0.1 M NaOH)，將洗脫產物 pH 調節至中性，樣品用于后期功能分析。注: 本步驟洗脫的抗原為抗原-抗體復合物，如操作者需要單獨洗脫目標抗原，推薦使用交聯劑，并按相關實驗說明操作。

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