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Dxy_NS PROTEIN LABELING REAGENT EA

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    Invitrogen No-Stain 蛋白標記試劑提供了一種靈活、準確、快速和可靠的方法,用于可視化和歸一化凝膠或膜上的蛋白(轉(zhuǎn)印后)。它在 10 分鐘內(nèi)與凝膠或膜上的蛋白形成共價鍵,無需任何去染色步驟,并且可以使用任何常用的成像儀立即實現(xiàn)可視化。No-Stain 試劑不需要任何特定凝膠或其他試劑,并且與凝膠染色和 western 印跡工作流程兼容。

    凝膠蛋白持續(xù)可視化
    考馬斯和其他凝膠染色及去染色步驟非常耗時且繁瑣。No-Stain 蛋白標記試劑在 10 分鐘內(nèi)與凝膠中的所有蛋白上的賴氨酸氨基酸側(cè)鏈形成共價鍵。由于賴氨酸是的氨基酸之一,No-Stain 試劑可檢測凝膠或膜上的所有蛋白,并且從共價鍵合試劑發(fā)射出的強信號具有納克級的靈敏度。

    ?替代傳統(tǒng)凝膠染色試劑—能夠在廣泛的蛋白裂解液濃度范圍內(nèi)提供更準確的歸一化 (1–80 µg)
    ? 靈敏—檢測下限為 20 ng/條帶
    ? 特異性—僅與蛋白的賴氨酸側(cè)鏈結(jié)合成鍵。未結(jié)合的試劑不會發(fā)射熒光,因此具有信噪比
    ? 靈活—無需更換凝膠即可便利地進行無需染色的操作。No-Stain 試劑無需染色,可使用任何凝膠類型(預制或手灌膠)

    獲得用于定量 Western 印跡的金標準
    蛋白歸一化是獲得可靠且可重現(xiàn)的定量 Western 印跡的關(guān)鍵步驟。總蛋白歸一化被視為定量 Western 印跡的金標準。許多主流期刊已經(jīng)制定了提交 Western 印跡研究的指南,指南中的相關(guān)引文展示如下。

    ?“為進行定量比較,應使用適當?shù)脑噭φ掌泛途哂芯€性信號轉(zhuǎn)導范圍的成像方法” – 性質(zhì)
    ? “記錄如何獲得數(shù)據(jù)、信號強度是否與抗原上樣呈線性關(guān)系以及如何歸一化蛋白上樣量” – Journal of Biological Chemistry
    ? “將信號強度歸一化至總蛋白上樣量(通過染色膜對總蛋白進行評估)(如果可能)” – Journal of Biological Chemistry
    ? “在沒有證據(jù)證明操作步驟不會影響表達時不應使用管家蛋白” – Journal of Biological Chemistry

    準確的上樣對照應在所有實驗條件下顯示信號強度與樣品上樣量之間的線性關(guān)系。通過使用 No-Stain 試劑標記膜上總蛋白獲得的信號強度,就可在所有實驗條件下,確保與樣品上樣量呈線性關(guān)系(參見下圖)。因此,在定量 Western 印跡應用中使用 No-Stain 試劑可以使用總蛋白作為理想上樣對照。

    ?易于使用方案—可在 10 分鐘內(nèi)在硝酸纖維素或 PVDF 膜上進行蛋白標記
    ? 快速可視化使用具有 UV 或熒光光源的廣泛成像儀
    ? 準確的總蛋白質(zhì)歸一化


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