NE-PER核蛋白-胞漿蛋白分離試劑
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- 公司名稱 賽默飛世爾科技（中國）有限公司
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- 廠商性質
- 更新時間 2024/11/14 15:57:33
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- Thermo Scientific NE-PER核蛋白-胞漿蛋白抽提試劑盒提供了高效的核蛋白抽提方法，用戶只需擁有臺式微量離心機、離心管和移液器，進行簡單的分步式細胞裂解及核蛋白與胞漿蛋白離心分離即可。NE-PER 試劑盒能夠高效地將胞漿蛋白與核蛋白溶解和分離為不同組分，交叉污染以及基因組 DNA/mRNA 的干擾均降到了。一旦經過脫鹽或稀釋，分離后的蛋白即可用于免疫分析和蛋白相互作用實驗，如遷移率分析(EMSA)、免疫共沉淀 (Co-IP) 和拉下實驗。
- 快速-2小時內獲得胞核與胞漿內的可溶性蛋白組分，交叉污染以及基因組DNA/mRNA的干擾均降到了
- 可靠-超過“萬篇”的文獻出鏡率，廣受科研工作者喜愛
- 通用-培養細胞或者組織（新鮮樣本）
- 高活性-獲得樣本適合于多種下游應用，包括免疫印跡、凝膠遷移分析(EMSA)、報告基因分析以及酶活性分析
- 可擴展—兩種規格試劑盒，滿足從細胞和組織中抽提樣本的應用需求
- 方便—操作簡單，無需超速梯度離心
圖1.獲取的細胞核和細胞質組分幾乎無交叉污染。采用NE-PER細胞核和細胞質抽提試劑與其他品牌的細胞核抽提試劑盒提取 HeLa 細胞。使用常用的核蛋白、胞質蛋白和膜蛋白標志物的抗體，采用NE-PER 試劑盒所得的細胞核組分幾乎無胞質或膜蛋白污染。
圖2. 抽提各種組織中蛋白的Western Blot結果。使用NE-PER核蛋白和胞漿蛋白抽提試劑，從不同組織中富集和分離核蛋白和胞漿蛋白，并分別進行Western Blot檢測。
分離胞核和制備核蛋白抽提物的方法很多，但大多數制備核蛋白抽提物的制備方法都很耗時，并需要機械勻漿、凍融循環、反復離心或透析，而這些都可能影響核蛋白的完整性。NE-PER 核蛋白-胞漿蛋白抽提試劑盒使用了基于試劑的分離方案，能夠分步裂解細胞并從胞漿中分離出完整的細胞核，然后再從基因組 DNA 與 mRNA 中抽提核蛋白。這一溫和的過程可在兩小時之內完成，且使用培養細胞時僅需標準的桌臺式離心機即可。此外，用戶還可以從細胞培養物或組織樣本中分離得到具有活性的核蛋白與胞漿蛋白。
本試劑盒能夠從兩百萬個細胞中提出 200 至 500µg 胞漿蛋白和 100 至 200µg 的核蛋白（濃度為 1mg/mL）。一般情況下，胞漿蛋白與核蛋白之間的交叉污染在 10% 左右。本方法分離得到的主要是細胞核中的可溶蛋白，而非與染色質結合的蛋白或核膜整聯蛋白。可通過調整核抽提試劑（NER）的體積來改變胞核抽提物的蛋白濃度，而不會對抽提效率造成顯著影響。從細胞中專一地抽提核蛋白是許多基因調控研究的關鍵，然而現有的許多分離細胞核、制備核蛋白抽提物的方法都十分耗時，且需要進行機械勻漿、凍融循環、重復離心或透析等操作，對許多脆弱的核蛋白的完整性造成影響。NE-PER 試劑盒能夠克服這些問題，通過 EMSA 及其他分析技術為用戶提供高質量的濃縮核蛋白抽提物。
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