流式JC-1檢測實驗服務
- 公司名稱 上海達為科生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
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- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2024/11/11 13:18:28
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流式JC-1檢測實驗服務
JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位(ΔΨm)的熒光探針。在正常的線粒體中,JC-1聚集形成聚合物,發出紅色熒光;而在線粒體膜電位降低時,JC-1不能聚集,以單體形式存在,發出綠色熒光。通過測量紅色和綠色熒光的強度比值,可以評估線粒體的健康狀況和細胞凋亡的早期事件。
流式JC-1檢測實驗服務操作步驟
1.JC-1工作液的配制:首先將JC-1固體粉末溶解在DMSO中制備存儲液,然后用緩沖液或培養基稀釋至工作濃度。
2.細胞染色:將細胞與JC-1工作液共同孵育,以允許JC-1進入線粒體并積累。孵育時間和溫度根據細胞類型和實驗要求而定。
3.洗滌:孵育后,使用緩沖液洗滌細胞以去除未進入線粒體的JC-1。
4.流式細胞儀分析:使用流式細胞儀檢測細胞的紅色和綠色熒光,通過設置合適的激發和發射波長(通常是488nm激發和525nm/590nm發射)來分析JC-1的熒光信號。
5.結果分析:根據紅色和綠色熒光的強度比值,評估線粒體膜電位的變化。線粒體去極化的細胞會顯示較低的紅色/綠色熒光比值。
實驗中的關鍵點和注意事項
1.在實驗過程中應避免直接光照射JC-1,因為它對光敏感。
2.孵育和洗滌步驟應在適宜的溫度下進行,以保證JC-1能夠有效地進入線粒體。
3.使用流式細胞儀時,應選擇合適的濾光片以區分紅色和綠色熒光。
4.應設置適當的陰性和陽性對照,以驗證實驗條件的有效性。
5.實驗后應盡快進行分析,以避免熒光淬滅。