CC96147 MG1655感受態
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- 公司名稱 上海語純生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 CC96147
- 產地
- 廠商性質 經銷商
- 更新時間 2024/11/4 15:27:57
- 訪問次數 30
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供貨周期 | 現貨 |
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產品簡介
MG1655 菌株來源于 W1485,是 K12 的衍生菌株,是一種經過較少改造、比較接近于“野生型”的大
腸桿菌工程菌株。MG1655 外觀形態標準,既可做為擴增大腸桿菌野生型基因的模板使用,也可作
為蛋白表達的宿主菌株使用;但該菌株不含核酸酶 endA1 突變,因此體內核酸酶含量較高:提取質
粒時務必使用質粒提取試劑盒中的去蛋白液處理,以盡量去除核酸酶,否則提取的質粒很容易被
降解。經 pUC18 質粒轉化檢測,MG1655 感受態細胞的轉化效率可達 108 cfu/μg DNA。
產品組成
組分
MG1655
化學感受態細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:K12 F- λ- ilvGrfb-50 rph-1
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留;
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min;
5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養箱培養過夜。
注意事項
1. 感受態細胞冰水浴中解凍后應立即使用;
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10;
3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態細胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優良轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。