CC96135 Stbl4感受態(tài)
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱(chēng) 上海語(yǔ)純生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) CC96135
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷(xiāo)商
- 更新時(shí)間 2024/11/4 12:55:06
- 訪問(wèn)次數(shù) 39
產(chǎn)品標(biāo)簽
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Stbl4 電轉(zhuǎn)化大腸桿菌細(xì)胞是 Stbl2 細(xì)胞的衍生物,非常適合克隆不穩(wěn)定插入物,如逆轉(zhuǎn)錄病毒序列、
直接重復(fù)序列和串聯(lián)陣列基因。此外, Stbl4 細(xì)胞可用于使用質(zhì)粒衍生載體產(chǎn)生 cDNA 文庫(kù),并能
夠吸收和維持大質(zhì)粒(例如 50kb 粘粒和 100 - 200 kb P1 克隆)。Stbl4 細(xì)胞還含有一個(gè) F’附加體,允
許它們作為單鏈 DNA 的宿主,如 M13mp 克隆載體。由于攜帶 lacZΔM15 突變,因此該菌可用于含
Xgal 和 IPTG 的瓊脂平板上菌落的藍(lán)/白斑篩選。mcrA 突變和 mcrBC - hsdRMS - mrr 缺失允許克隆甲
基化的基因組序列。最后,endA1 突變大大提高了質(zhì)粒產(chǎn)量和質(zhì)量。經(jīng) pUC18 轉(zhuǎn)化檢測(cè),Stbl4 感
受態(tài)細(xì)胞的效率可達(dá) 108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
Stbl4
感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:mcrA Δ(mcrBC-hsdRMS-mrr) recA1 endA1 gyrA96 galthi-1 supE44 λ- relA1 Δ(lac-proAB)/F' proAB+lacIqZΔM15
Tn10 (TetR)
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存,請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動(dòng),熱激 90 s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入900 μL LB或SOC培養(yǎng)基(室溫或37 ℃預(yù)熱),然后置于37 ℃搖床復(fù)壯45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率,整個(gè)操作過(guò)程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。