檢測原理：
細胞上清液、樣本或標準品直接分配到檢測板中，通過 HTRF® 試劑進行檢測（384 孔低體積白色板或 Revvity 低體積 96 孔板，20 微升）。用 HTRF 供體和受體標記的抗體預先混合，并在一個分配步驟中加入，以進一步簡化檢測程序。通過簡單地按比例調(diào)整每次添加的體積，該檢測可以擴展到 1536 孔格式。

檢測數(shù)據(jù)分析：
四參數(shù)邏輯（4PL）曲線通常被推薦用于擬合 ELISA 標準曲線。這種回歸能夠在比線性分析更寬的濃度范圍內(nèi)準確測量未知樣本，使其非常適合用于分析細胞因子釋放等生物系統(tǒng)。

Revvity 還與 Myassays 合作，以幫助你進行數(shù)據(jù)分析。

檢測細節(jié)：
人 IL8 試劑盒的技術規(guī)格

分析性能：
批內(nèi)和批間

稀釋線性：
從這些實驗中獲得的出色的回收率百分比顯示了該檢測的良好線性。

加標回收：
將相同量的重組細胞因子添加到兩種不同的血清樣本中，并將從標準曲線獲得的一組響應與計算出的預期值進行比較。發(fā)現(xiàn)約 100% 的回收率驗證了用于該檢測的樣本基質(zhì)。

檢測驗證：
用 JTE607 抑制 THP1 細胞中 IL8 的分泌：
以每孔 100,000 個細胞的密度接種 THP1 細胞，用不斷增加濃度的 JTE607 孵育 18 小時，然后用 2 µg/mL 的 LPS 刺激 3 小時。然后將 16 µL 的上清液轉(zhuǎn)移到白色檢測板（384 孔低體積）中，用人 IL8 檢測進行分析。

LPS 刺激的外周血單個核細胞（PBMC）中 IL8 的分泌：

以每孔 50,000、100,000、200,000 和 400,000 個細胞的密度接種 PBMC，用不斷增加濃度的 LPS（0、0.02、0.2、2 µg/mL）刺激 3 小時。然后將 16 µL 的上清液轉(zhuǎn)移到白色檢測板（384 孔低體積）中，用人 IL8 檢測進行分析。