Listlabs Pertussis Toxin  百日咳毒素

（Cat#179A Pertussis Toxin,PTX）

主要應用：

PTX常與MOG（35-55），PLP（139-151），PLP（178-191）等免疫肽聯合注射動物，從而建立實驗性自身免疫性腦脊髓炎（Experimental Autoimmune Encephalomyelitis，EAE）模型，即用來研究多發性硬化癥（Mutiple sclerosis，MS）的常用動物模型。

基本介紹：

百日咳毒素（Pertussis toxin，PTX）是一種由6個非共價連接亞基組成的多元件蛋白，分子量范圍約為9-28kDa，這些亞基分別命名為S1，S2，S3，S4和S5，天然百日咳毒素中所占比為1:1:1:2:1，其中S4亞基以2倍形式存在。最大亞基為S1（也稱為A啟動子），包含NAD+糖基水解酶和ADP-核糖基轉移酶活性。單獨的A啟動子能夠將NAD+的ADP核糖轉移到Gαi，Gαo或Gαt家族G蛋白的α亞基。PTX的結晶結構顯示其呈金字塔形狀，A啟動子位于塔尖，中間是S5，最底端是二個二聚體，分別是S2-S4,和S3-S4。這5個亞基統稱為B寡聚體亞基（S2，S3，S4，S4和S5），允許PTX進入大部分細胞，使其粘附在包括TLR4和糖蛋白Ib在內受體蛋白的多糖殘基上。通過受體介導的內吞作用進入細胞后，PTX通過胞內體途徑和高爾基體復合物逆向轉運進入內質網。A啟動子從PTX上釋放出來，穿透內質網膜并導致目標膜偶聯的G蛋白失活。

生理功能：

百日咳毒素（Pertussis toxin，PTX）由Bordetella pertussis代謝純化所得，一種多亞基毒素，與大多數哺乳動物培養細胞結合并特定靶向G蛋白，抑制G蛋白及其在信號通路中的生理功能。PTX的生理效應因G蛋白功能不同而變化。正是依賴Gi家族的蛋白偶聯受體來抑制信號通路的能力，PTX是細胞生物學研究中的一種重要工具。PTX通過抑制和調節各種宿主對Bordetella pertussis的免疫反應在傳染方面發揮重要作用。鼠類動物模型中PTX還能用來刺激建立實驗性自身免疫疾病，比如實驗性自身免疫性腦脊髓炎（Experimental Autoimmune Encephalomyelitis，EAE）模型。

產品信息

List labs提供三種配方形式的百日咳毒素（Pertussis toxin，PTX），分別是甘油溶液（貨號：179），溶于緩沖液的凍干粉（貨號：180），以及溶于純水的凍干粉（貨號：181）。

組成：

每瓶含50ug的百日咳毒素，用：500ul水重懸后為：含50ug百日咳毒素的0.01mol/L的磷酸鈉，0.05mol/L氯化鈉，pH7.0的緩沖液。使用前請輕輕混勻，保證溶解為均質狀態。請不要無菌過濾，這樣會導致原料損失。溫和操作，不要渦旋混勻。

產品濃度：

用牛血清白蛋白作為標準品，Bradford 方法測定蛋白濃度。

純度：

16% SDS-PAGE電泳，有5條單獨條帶，與Tamura 等報道的一致，純度＞95%。

產品經內毒素檢測，在可接受范圍。

實驗：

CHO細胞實驗：參照Hewlett等報道的方法，能夠引起陽性反應的毒素濃度為：0.1ng/m（以具體批次為準）l。注意：毒性可能因批次不同而不同。每個實驗室應根據具體的實驗，優化最佳的使用劑量。

腺苷酸環化酶測定實驗：參照Wolff 報道的方法，Adenylate Cyclase 活性（以具體批次為準）,出現1umol的鈣調蛋白，是1.6pmol CAMP/min/ug 毒素。

保存：

凍干粉形式和重懸后均2-8℃保存，不要凍。

活化：

本產品非活化形式，如果需要活化形式，請參照文獻（Kaslow et al）實驗條件。

防護：

操作時，請穿上實驗服，帶上手套和防護眼鏡。此產品僅供科研應用，不可用于診斷試劑。對因不當操作引起的傷害，公司不負責。