抗體去除液（Western）
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 上海貝博生物科技有限公司
- 品牌 貝博生物
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2024/11/9 18:18:04
- 訪問(wèn)次數(shù) 157
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2-8℃
注意事項(xiàng)
試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完！
有效期
一年
使用注意事項(xiàng)
1、有許多因素影響抗體從膜洗脫，如膜類型、抗體類型和濃度及其與抗原結(jié)合特性。因此需要優(yōu)化抗體去除液中孵育膜的時(shí)間。
2、確定膜上抗體是否去除與優(yōu)化抗體去除液孵育膜的時(shí)間：用ECL工作液孵育再生后的膜約1分鐘，然后進(jìn)行X 光膠片曝光并顯影，可確定膜上的抗體是否去除。如膠片上顯示條帶，表明抗體未去除，應(yīng)繼續(xù)將膜浸泡在抗體去除液中另外孵育30-60 分鐘。然后再次ECL 檢查膜上抗體是否去除。重復(fù)此步驟直到抗體去除并確定孵育時(shí)間。
3、使用脫脂奶粉封閉的膜要比使用BSA 封閉的膜上的抗體更容易被去除下來(lái)。因此準(zhǔn)備進(jìn)行再生的膜，應(yīng)該使用脫脂奶粉而不是BSA 封閉。
4、盡量避免使用干燥保存的膜，干的膜上的抗體很難被去除干凈。
5、PVDF 膜上使用的效果好于硝酸纖維素膜。
6、使用非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western檢測(cè)，例如DAB，NBT/BCIP，不適用于本試劑。
2、確定膜上抗體是否去除與優(yōu)化抗體去除液孵育膜的時(shí)間：用ECL工作液孵育再生后的膜約1分鐘，然后進(jìn)行X 光膠片曝光并顯影，可確定膜上的抗體是否去除。如膠片上顯示條帶，表明抗體未去除，應(yīng)繼續(xù)將膜浸泡在抗體去除液中另外孵育30-60 分鐘。然后再次ECL 檢查膜上抗體是否去除。重復(fù)此步驟直到抗體去除并確定孵育時(shí)間。
3、使用脫脂奶粉封閉的膜要比使用BSA 封閉的膜上的抗體更容易被去除下來(lái)。因此準(zhǔn)備進(jìn)行再生的膜，應(yīng)該使用脫脂奶粉而不是BSA 封閉。
4、盡量避免使用干燥保存的膜，干的膜上的抗體很難被去除干凈。
5、PVDF 膜上使用的效果好于硝酸纖維素膜。
6、使用非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western檢測(cè)，例如DAB，NBT/BCIP，不適用于本試劑。
使用方法
1、將膜充分浸泡于適當(dāng)體積的抗體去除液中，室溫孵育15-30 分鐘并不時(shí)晃動(dòng)。孵育時(shí)間的長(zhǎng)短應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化。洗脫某些抗體需要較長(zhǎng)的時(shí)間如30-60 分鐘。
2、用鑷子取出膜，用自備Western Blot 洗滌緩沖液快速淋洗膜一次，然后用TBST洗膜3次，每次10分鐘。
3、此時(shí)膜上抗體已去除膜已經(jīng)再生。用脫脂奶粉或BSA 封閉一小時(shí)，進(jìn)行下一輪Western Blot 實(shí)驗(yàn)。
2、用鑷子取出膜，用自備Western Blot 洗滌緩沖液快速淋洗膜一次，然后用TBST洗膜3次，每次10分鐘。
3、此時(shí)膜上抗體已去除膜已經(jīng)再生。用脫脂奶粉或BSA 封閉一小時(shí)，進(jìn)行下一輪Western Blot 實(shí)驗(yàn)。
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