98010ES Mouse IL-17A ELISA Kit
參考價 | ¥2155.00 |
- 公司名稱 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 品牌Yeasen/翌圣生物
- 型號98010ES
- 所在地上海市
- 廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
- 更新時間2024/2/15 21:10:42
- 訪問次數(shù) 257
48T | 2155.00元 | 99 件可售 |
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供貨周期 | 兩周 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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產(chǎn)品簡介
白細胞介素17(IL-17)家族蛋白包括六個成員(IL-17/IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E/IL-25和IL-17F),是分泌的結構相關蛋白,在C末端附近共享保守的胱//氨酸結折疊,但在N末端具有相當大的序列差異。除了作為非共價連接二聚體存在的IL-17B外,所有IL-17家族成員都是二硫鍵連接的二聚體。IL-17家族蛋白是誘導局部細胞因子產(chǎn)生并參與免疫功能調(diào)節(jié)的促炎細胞因子。IL-17調(diào)節(jié)NF-κB和促分裂原活化蛋白激酶的活性。這種細胞因子可以刺激IL6和環(huán)氧合酶-2(PTGS2/COX-2)的表達,并增強一氧化氮(NO)的產(chǎn)生。高水平的IL-17與幾種慢性炎癥性疾病有關,包括類風濕性關節(jié)炎、銀屑病和多發(fā)性硬化癥。
翌圣Mouse IL-17A/F Heterodimer ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定血清、血漿中的小鼠白介素17A/F 異二聚體蛋白(Mouse IL-17A/F Heterodimer)。特異性抗小鼠白介素17A/F 異二聚體蛋白抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本,經(jīng)過孵育,樣本中存在的小鼠白介素17A/F 異二聚體蛋白與固相抗體結合。洗滌去除未結合的物質(zhì)后,加入檢測抗體孵育結合,經(jīng)洗滌,再加入酶結合物(Streptavidin-HRP)孵育結合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中小鼠白介素17A/F 異二聚體蛋白的濃度成正比。加入終止液終止反應,在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
產(chǎn)品信息
貨號 | 98010ES48 / 98010ES96 |
規(guī)格 | 48 T / 96 T |
檢測范圍 | 46.88-3000 pg/mL |
檢測方法 | 雙抗夾心法 |
檢測物種 | 小鼠 |
檢測時長 | 4.5小時 |
靈敏度 | 12.18 pg/mL |
稀釋線性 | 80 - 124% |
回收率 | 78 - 122% |
板內(nèi)差 | 4.9% |
板間差 | 6.6% |
實驗數(shù)據(jù)
標曲數(shù)據(jù)
濃度(pg/mL) | 顯色值 | 平均值 | 校準值 | |
3000 | 2.032 | 2.086 | 2.059 | 2.057 |
1500 | 1.263 | 1.283 | 1.273 | 1.283 |
750 | 0.738 | 0.784 | 0.761 | 0.744 |
375 | 0.381 | 0.430 | 0.406 | 0.413 |
187.5 | 0.203 | 0.237 | 0.220 | 0.224 |
93.75 | 0.112 | 0.125 | 0.118 | 0.121 |
46.88 | 0.068 | 0.069 | 0.069 | 0.067 |
0 | 0.011 | 0.010 | 0.010 | / |
數(shù)據(jù)擬合繪制標準曲線,生成的標曲用于實驗數(shù)據(jù)分析。
標準曲線圖
靈敏度檢測
IL-17A/F Heterodimer的 檢測限為12.18 pg/mL,通過使用重復檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。
精密度檢測
酶標板內(nèi)精密度
3個已知濃度的樣本酶標板內(nèi)重復測定6次,評估酶標板內(nèi)的精密度。
酶標板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測20次,評估酶標板間的精密度。
項目 | 板內(nèi)精密度 | 板間精密度 | ||||
樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
6 | 6 | 6 | 20 | 20 | 20 | |
平均值 | 1398.32 | 321.12 | 77.48 | 1403.42 | 325.91 | 77.59 |
標準差 | 87.86 | 16.57 | 2.44 | 105.95 | 19.59 | 4.86 |
變異系數(shù)(%) | 6.3 | 5.2 | 3.2 | 7.5 | 6.0 | 6.3 |
回收率檢測
通過不同水平的IL-17A/F Heterodimer添加于樣本中來測定回收率,其回收率如下:
樣本類型 | 平均回收率(%) | 范圍(%) |
血清 | 97.4 | 90.7-106.1 |
血漿 | 99.9 | 78.4-122.6 |
細胞培養(yǎng)上清 | 92.1 | 82.7-107.5 |
稀釋線性檢測
血清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍(%) |
1:02 | 110.5 | 98.6-124.4 |
1:04 | 107.2 | 89.0-120.3 |
1:08 | 105.8 | 95.4-111.4 |
1:16 | 99.7 | 84.4-108.6 |
血漿稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍(%) |
1:02 | 97.1 | 95.3-100.2 |
1:04 | 91.0 | 80.4-99.0 |
1:08 | 86.8 | 79.6-95.1 |
1:16 | 89.3 | 87.0-91.7 |
細胞培養(yǎng)上清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍(%) |
1:02 | 102.2 | 98.4-106.5 |
1:04 | 99.1 | 93.8-102.6 |
1:08 | 95.8 | 90.2-102.8 |
1:16 | 92.5 | 86.2-97.3 |
樣本值
應用本試劑盒,檢測若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。
樣本類型 | 樣本數(shù)目 | 平均值(pg/mL) | 樣本值(pg/mL) |
血清 | 6 | n.d. | n.d. |
血漿 | 4 | 64.5 | n.d.-132.6 |
細胞培養(yǎng)上清 | 4 | n.d. | n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得46.88 pg/mL
測定特異性
本試劑盒識別天然和重組小鼠白介素17A/F 異二聚體蛋白。下述因子進行了特異性的評估,沒有觀察到明顯的交叉反應和干擾影響。
Recombinant human: | Recombinant Mouse: | |
GM-CSF | IL-10 | GM-CSF |
IFN-γ | IL-12 | IFN-γ |
IL-1α | IL-17A | IL-1α |
IL-1β | IL-18 | IL-1β |
IL-2 | IL-23 | IL-4 |
IL-4 | TNF-α | IL-6 |
IL-5 | IL-10 | |
IL-6 | TNF-α |
檢測簡圖
疑問解答
問題 | 造成原因 | 解決方法 |
標曲不好 | 移液量不準確 | 檢查移液器,按時校準,仔細操作,充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
稀釋方法不恰當 | ||
顯色值偏低 | 孵育時間太短 | 給予足夠的孵育時間,樣本和溶解的標準品隔夜后更換。 |
移液量不足或稀釋不當 | 校準移液器和規(guī)范操作 | |
CV偏高 | 酶標板清洗不當 | 使用正確的洗滌工序;如果使用洗板機,檢查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 | 準備新鮮洗液 | |
靈敏度較低 | 試劑盒儲存不當 | 按照產(chǎn)品組分表進行保存。 |