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TSKgel色譜柱用于ADC藥物質控分析

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TOSOH/東曹色譜柱

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綠百草科技發展有限公司是一家從事色譜層析、純化、天然產物提取、分離技術的開發、技術服務、技術培訓的科技型公司,專業代理國內外純化介質、填料、色譜柱、實驗室儀器設備、耗材、試劑、生產用動態軸向加壓柱系統。公司位于高科技企業密集的北京中關村科技園區。 綠百草公司以的技術和產品,在天然產物提取物、中藥、西藥、生物制藥、食品、環境監測、石化、新材料等領域向廣大科研工作者和生產廠提供*的服務。



色譜層析、純化、天然產物提取、分離技術的開發、技術服務、技術培訓的科技型公司,專業代理國外純化介質,填料、色譜柱、實驗室儀器設備、耗材、試劑、生產用動態軸向加壓柱系統。綠百草科技主要代理:日本三菱化學公司、日本YMC公司、日本TOSOH公司、日本NACALAI TESQUE公司、日本DAICEL公司、日本隹友SCAS公司、德國默克MEICK公司、美國SEPAX TECHNOLOGIES公司、美國USP、英國Chrom Tech、美國Waters.

供貨周期 現貨 應用領域 綜合


TSKgel色譜柱用于ADC藥物質控分析

抗體偶聯藥物(ADC)是一種將抗癌藥物等偶聯到抗體中的生物藥物,近年來,以ADC和雙特異性抗體為代表的新型抗體藥物的研發進展迅速,目前全球已有16ADC藥物被批準上市。此外,研發人員還開始探索均一性更高、副作用(脫靶毒性)更少的第三代ADC藥物,因此ADC的純化及質控分析方法將變得日趨重要。

1. ADC的關鍵質量屬性及其分析法
ADC
的關鍵質量屬性及其分析法如表1所示。其中,非變性色譜的特點是在分離時可保持抗體的高級結構和活性。在分離藥物和抗體的偶聯比 (DAR) 不同的成分時,常使用疏水色譜法。

此外,還可以使用揮發性流動相的SEC/MS進行DAR分析1)。作為與抗體ADCC活性相關聯的分離,研發人員還探討了通過親和色譜法來分離ADC23)。另有文獻稱在抗體、寡核苷酸偶聯物 (AOC) 的偶聯比分析中使用了陰離子交換色譜 4)。

1. ADC關鍵質量屬性及其分析法

                  TSKgel色譜柱用于ADC藥物質控分析                            

TSKgel色譜柱用于ADC藥物質控分析


* MRM: Multiple reaction monitoring

Ref.: G. Petrie et al, White paper, 2017, https://www.eag。。com/wp-content/uploads/2018/01/M-028517-Keys-to-Rapid-IND-Submission.pdf

2. ADC非變性色譜分析的分離模式
分析ADC時,為了抑制有效載荷偶聯而增加的疏水性,即使是在非變性條件下,有時也需要在流動相中添加異丙醇和乙腈等有機溶劑 (525%)

2中歸納了ADC非變性分析、變性分析的分離模式,以及各自的分離對象和特征。

2. ADC非變性分析/變性分析的分離模式


TSKgel色譜柱用于ADC藥物質控分析

TSKgel色譜柱用于ADC藥物質控分析  

3. ADC藥物的SEC分析
尺寸排阻色譜法通常用于分離ADC的二聚體、多聚體和片段。下圖是使用TSKgel UP-SW3000分析ADC的譜圖。


TSKgel色譜柱用于ADC藥物質控分析



TSKgel色譜柱用于ADC藥物質控分析


2ADC藥物在不同SEC色譜柱上的分離情況比較。相比其他兩款SEC色譜柱,TSKgel UP-SW3000在多聚體的分離上可以獲得更多組分信息。


TSKgel色譜柱用于ADC藥物質控分析



TSKgel色譜柱用于ADC藥物質控分析


4. ADCDAR值分析
在分離藥物和抗體的偶聯比不同的成分時,常使用分辨率高,非多孔型基質HIC色譜柱。東曹公司最近上市的新型HIC色譜柱TSKgel HIC-ADC Butyl提高了ADC的分離選擇性,能夠實現更高效的分析。


TSKgel色譜柱用于ADC藥物質控分析


從譜圖中看到,TSKgel HIC-ADC Butyl分離ADC模擬物 (DAR=0,2,4,6,8) 的峰間距更寬,比市售其他品牌的HIC色譜柱具有更寬的分離范圍和更出色的分離度。




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