DIGE技術(shù)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
- 公司名稱 杭州研謹(jǐn)生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2022/3/18 10:24:49
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產(chǎn)地類別 | 國(guó)產(chǎn) | 價(jià)格區(qū)間 | 面議 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
DIGE技術(shù)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
實(shí)驗(yàn)技術(shù)簡(jiǎn)介:
DIGE一雙向熒光差異凝膠電泳(Two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis ,2D-DIGE),是在傳統(tǒng)雙向電泳的基礎(chǔ)上發(fā)展而來(lái)的新型蛋白質(zhì)組學(xué)定量技術(shù),其分離蛋白質(zhì)混合的原理與雙向電泳是一致的, 主要利用蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)和分子量的差異來(lái)分離蛋白質(zhì)混合物,同時(shí)應(yīng)用熒光染料的靈敏度及內(nèi)標(biāo)的使用等技術(shù),使其在定量蛋白質(zhì)組學(xué)的研究中效果明顯優(yōu)于傳統(tǒng)雙向電泳。DIGE使用的熒光染料有Cy2, Cy3和Cy5,它們能與蛋白質(zhì)的賴氨酸側(cè)鏈氨基反應(yīng)而使蛋白質(zhì)被標(biāo)記,被標(biāo)記蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)和分子量幾乎不受影響,等量混合標(biāo)記好的蛋白質(zhì)后進(jìn)行雙向電泳,不同凝膠之間可以
通過(guò)cy2內(nèi)標(biāo)匹配,消除凝膠之間的差異,蛋白質(zhì)表達(dá)量的變化則通過(guò)cy3和cy5不同熒光的強(qiáng)度來(lái)體現(xiàn)。
與常規(guī)雙向電泳后,銀染或考染膠相比,DIGE具有以下優(yōu)勢(shì):
1、靈敏度高,Z低可檢測(cè)到125pg的蛋白質(zhì);
2、高效性,同一塊凝膠上可以電泳兩個(gè)樣品,減輕了工作量;
3、線性范圍更廣,動(dòng)態(tài)范圍高達(dá)10-5;
4、定量精確,采用內(nèi)標(biāo)消除了凝膠與凝膠之間的實(shí)驗(yàn)誤差,顯著提高了實(shí)驗(yàn)的精確度和可重復(fù)性;
5、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,ImageMaster7.0 (DIGE) 軟件可以得到統(tǒng)計(jì)學(xué)可信的結(jié)果,降低了操作者之間的偏差。
DIGE技術(shù)服務(wù)流程
DIGE技術(shù)服務(wù)內(nèi)容
1、樣本制備與定量; .
2、熒光標(biāo)記;
3、雙向電泳和圖片分析;
4、DIGE實(shí)驗(yàn)報(bào)告提交。
送樣須知:
1、技術(shù)咨詢:在您開(kāi)展實(shí)驗(yàn)之前,本公司將為您竭誠(chéng)提供有效的DIGE實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案。
2、為了保證DIGE實(shí)驗(yàn)?zāi)茼樌M(jìn)行,樣品須液氮或干冰保存寄送,
注:樣本應(yīng)避免各類污染和反復(fù)凍融。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi):
1、DIGE熒光電子圖片;
2、蛋白質(zhì)點(diǎn)定量分析結(jié)果,包括差異點(diǎn)號(hào)碼、差異倍數(shù)、pI和MW等;
3、完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)步驟、使用儀器、軟件檢索參數(shù)等。