細胞樣本中甘油含量檢測試劑盒
- 公司名稱 上海信帆生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2024/10/24 16:25:11
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供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 生物產業 |
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所有產品僅供科研使用,不能用于食用和醫療等
細胞樣本中甘油含量檢測試劑盒
適用范圍:測定實體組織、細胞中的甘油濃度。組成 (105 次微板測定或 30 次 1 ml 比色杯測定):
(1) 裂解液 50 ml
(2) R1 試劑 16 ml
(3) R2 試劑 4 ml
(4) 4 mmol/L 甘油標準品 1 ml
4 oC,儲存 3 月。
所需設備:酶標儀、生化分析儀或 721、722 型可
見光分光光度計。佳工作波長 550nm,如無此波
長建議優先選用 570nm、次選 530、490nm。
一 組織細胞裂解
細胞(包括分化的脂肪細胞)裂解: 消化、離心收集細胞。或直接在培養皿內裂解。通常6孔板單孔約2x106個細胞,75cm2瓶約1x107細胞。按比例每 1~2 x 106細胞加 0.1ml 裂解液,混勻,靜置 10 分鐘。
動物組織裂解:
切記要預先將新鮮組織切稱重后再進行保存。組織凍存后再進行解凍、剪切、稱重可能會產生嚴重的測量誤差。離心管精確稱重,加入組織塊后再稱重,二者相減(即減量稱重法)計算組織量(約 100mg)。強烈建議按比例每 1mg 組織加10µl裂解液以減少樣品間蛋白和脂質含量變異而產生的誤差。(注意;裂解液用量在 1ml 或更多可保證有效的裂解與脂質提取)。用電動高速勻漿器或手動玻璃勻漿器破碎組織。(不推薦超聲方法,因其不能*和均勻破碎。應根據預實驗調整初始的組織細胞加入量),而后,靜置 10 分鐘。
二. 裂解液處理:
1. 取適量上清液轉移到 1.5ml 離心管中,進行步驟
2 的操作。余下的裂解液可用 BCA 法蛋白定量試劑盒進行蛋白定量或-20oC 儲存。
2. 70oC 加熱 10 分鐘滅活脂肪酶,可能出現絮狀沉淀。
3. 室溫 5000rpm 離心 5 分鐘,上層清液即可用于酶學測定。
三 工作溶液配制:按 4:1 比例,取 4 ml 試劑 R1 與1 ml 試劑 R2 混合即可,立即使用或 4oC 保存<1 天,變色棄去。(注意:謹防來源不明但容易發生的甘油污染,可來自操作者本人或標準品液體微粒濺射等。)
細胞樣本中甘油含量檢測試劑盒