細(xì)胞色素氧化酶染色液(聯(lián)苯胺法)

產(chǎn)品貨號：R22034

產(chǎn)品規(guī)格：4×50ml

產(chǎn)品簡介：

細(xì)胞色素氧化酶(Cytochrome Oxidase，CO)被認(rèn)為是線粒體膜固有的酶，在含有大量線粒體的細(xì)胞(如心肌、腎小管上皮以及胃壁細(xì)胞、肝細(xì)胞)內(nèi)都具有高度活性。此酶活性往往作為細(xì)胞內(nèi)氧化代謝的指標(biāo)，亦作為線粒體的標(biāo)志酶之一。

尚寶生物 細(xì)胞色素氧化酶染色液(聯(lián)苯胺法)染色原理是細(xì)胞色素氧化酶催化3,3-二氨基聯(lián)苯胺(DAB)使其側(cè)鏈的氨基氧化，進(jìn)行反復(fù)的氧化性聚合和氧化性環(huán)化形成不溶性的棕色Phenazine聚合物。此酶對固定劑敏感，故須用新鮮切片。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

恒溫培養(yǎng)箱和光學(xué)顯微鏡。

操作步驟:

1. 冰凍切片，厚6μm，不固定。

2. 滴加CO清除液于切片上，鋪滿整個樣品表面。

3. 切片入DAB孵育液中，37℃避光孵育45～60min。

4. 移去切片上的染色液，滴加CO清除液于切片上，鋪滿整個樣品表面。

5. 蒸餾水稍洗3～5s。

6. (可選)滴加Lea蘇木素染色液淺染細(xì)胞核3～5min。

7. 流水沖洗10min。常規(guī)脫蠟透明，中性樹膠封固。

染色結(jié)果：

 CO 酶活性部位                   棕色

心肌、腎小管上皮內(nèi)顆粒(線粒體)    藍(lán)色

陰性對照(可選)：

取新鮮配制好的DAB孵育液，按DAB孵育液:CO對照液=50:1的比例混合，即為CO對照工作液。相同切片入CO對照工作液，室溫孵育30～60min，其余同上，呈陰性反應(yīng)。

注意事項：

1. 本染色液適用于冰凍切片，同時應(yīng)減少切片在室溫暴露的時間。

2. CO孵育液孵育時間因組織而異，心肌、腎孵育約20～30min，肝臟約50～60min，甲狀腺濾泡上皮約2h。

3. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

有效期：6個月有效。