檢測原理：

本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法。抗人IL-12/IL-23 p40單抗包被于微孔板上，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品中的IL-12/IL-23 p40會(huì)與固定在板上的抗體結(jié)合，游離的成分被洗去；加入辣根過氧化酶標(biāo)記的抗人IL-12/IL-23 p40多抗，未結(jié)合的抗體被洗去；加入底物溶液（顯色劑），溶液顏色與結(jié)合的目標(biāo)蛋白成正比；加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm波長(參考校正波長540nm或570nm)測定吸光度值。

檢測類型：雙抗夾心法

形式：預(yù)包被96孔板

檢測樣本類型：細(xì)胞上清液，血清，血漿

上樣量：100ul

試劑盒組分：

預(yù)包被96孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、抗人IL-12/IL-23 p40檢測抗體、稀釋用緩沖液、顯色液（A、B）、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。

靈敏度：3.5 pg/mL

檢測范圍：62.5 - 4,000 pg/mL

回收率范圍：89-114%

保存方法：2-8℃

標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

背景：

IL-12，也稱為自然殺傷細(xì)胞刺激因子（NKSF）或細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞成熟因子（CLMF），是主要由抗原呈遞細(xì)胞（單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞，樹突狀細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞）產(chǎn)生的多效細(xì)胞因子。 IL-12對(duì)T淋巴細(xì)胞和自然殺傷（NK）細(xì)胞具有多種作用，包括刺激細(xì)胞毒性，增殖，細(xì)胞因子產(chǎn)生和Th1亞群發(fā)育的能力。

IL-12是由二硫鍵連接的70 kDa（p70）異二聚糖蛋白，由40 kDa（p40）亞基和35 kDa（p35）亞基組成。 p40和p35亞基本身不具有IL-12活性，但已顯示p40的同型二聚體結(jié)合IL-12受體，并且是IL-12拮抗劑。

分別位于5號(hào)和3號(hào)染色體上的人類p40和p35的基因被獨(dú)立調(diào)節(jié)。 已發(fā)現(xiàn)p35 mRNA的表達(dá)幾乎普遍存在，但是，在僅表達(dá)p35或p35和p40 mRNA的細(xì)胞的培養(yǎng)上清液中未檢測到p35亞基。 在同時(shí)表達(dá)p35和p40 mRNA的細(xì)胞中，p40 mRNA表達(dá)水平更高，并且與異源二聚體IL-12 p70一起分泌了與p35亞基無關(guān)的游離p40亞基。 已發(fā)現(xiàn)所檢查的各種人類細(xì)胞系分泌的大多數(shù)游離p40亞基都以單體形式存在。 在各種活化的人單核細(xì)胞的上清中，游離p40的含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過p70，通過生物測定法測得的p70水平與使用p70特異性免疫測定法測得的水平一致，這表明p40單體不是有效的IL-12拮抗劑。 目前，游離的p40亞基的生理作用尚不清楚。