基因敲除（KO/CKO）是一種使生物體的某個基因失去功能的基因技術（從生物體中“敲除”）。然而，KO也可以指被敲除的基因或敲除了某基因的生物體。被敲除基因的生物體或基因敲除通常通過研究某基因缺失造成的影響推得該基因的功能。研究人員從基因敲除個體和正常個體之間的差異中得出推論。KO技術本質上與基因敲入相反。在生物體中同時敲除兩個基因被稱為雙基因敲除（Double Knockout, DKO）。類似地，術語三敲除(Triple Knockout, TKO)和四敲除(quadruple knockouts, QKO)分別用來描述敲除三個和四個基因。同時，我們需要單等位基因敲除（heterozygous KO，單敲）和雙等位基因敲除（homozygous KO，雙敲）。前者的兩個等位基因中只有一個被敲除，后者的兩個等位基因都被敲除。

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