酵母蛋白表達系統
- 公司名稱 安諾倫（北京）生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產地 北京
- 廠商性質 代理商
- 更新時間 2020/5/22 14:05:08
- 訪問次數 1878
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| 供貨周期 | 一個月以上 | 應用領域 | 生物產業 |
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酵母蛋白表達系統介紹
畢赤酵母（Pichia pastoris）表達系統是近年來發展迅速、應用廣泛的一種真核表達系統。它是甲醇營養型酵母菌，有兩個乙醇氧化酶（Alcohol oxidase, AOX）編碼基因AOX1和AOX2，兩種序列相似，AOX1基因嚴格受甲醇誘導和調控。當甲醇為碳源時，AOX1啟動子可被甲醇誘導，啟動乙醇氧化酶的表達，從而用甲醇進行代謝，含AOX1啟動子的質粒可用來促進編碼外源蛋白的目的基因的表達。
表達菌株特點
GS115：AOX1和AOX2基因都正常表達AOX蛋白（乙醇氧化酶），甲醇的利用率高，接近于野生型，屬于甲醇快速利用型（Mut+）
KM71：AOX1基因被大部分剔除，只能利用AOX2為AOX編碼，甲醇的利用速率變慢，表現為甲醇慢利用型（Muts）
外源基因的整合方式不同會導致表達菌株的表型不同：
菌株表型
酵母蛋白表達系統常用表達載體及篩選標記
載體信息
信號肽
對于胞外表達的蛋白除了可以用載體自帶的信號肽，還有以下信號肽可供選擇：
信號肽序列
畢赤酵母表達系統的優勢
1. 含有*的強有力的AOX（醇氧化酶基因）啟動子，用甲醇可嚴格地調控外源基因的表達。
2. 培養成本低，產物易分離，畢赤酵母所用發酵培養基成本合理，一般碳源為甘油或葡萄糖及甲醇，其余為無機鹽，培養基中不含蛋白，有利于下游產品分離純化。
3. 外源蛋白基因遺傳穩定，外源基因能以高拷貝數整合到畢赤酵母基因組中，不易丟失并能得到高表達菌株。
4. 作為真核表達系統，畢赤酵母具有真核生物的亞細胞結構，具有糖基化、脂肪酰化、蛋白磷酸化等翻譯后修飾加工功能。
艾柏森生物酵母表達系統的優勢
1. 具備完備的畢赤酵母表達平臺，可以根據蛋白特性或客戶的需求設計不同的實驗方案；
2. 具有高通量的篩選平臺，可以快速有效的得到好的表達條件；
3. 具有大規模發酵生產能力
服務組合
經典案例
表達載體pPIC3.5K（胞內表達），目的蛋白32.49KD（理論值）
表達菌株：GS115/KM71
誘導條件：甲醇濃度0.5%/1%，誘導時間24h/48/72h
結果分析：從SDS-PAGE膠圖中可以看到，目的蛋白（糖基化后40KDa左右）有明顯表達，其中GS115-5#-24h，0.5%甲醇，GS115-2#-48h，1%甲醇，GS115-3#-48h，01%甲醇，KM71-1#-72h，1%甲醇，都有很明顯的目的條帶，目的蛋白成功表達。
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