登革熱病毒IgM試劑盒
- 公司名稱 深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司
- 品牌 InBios
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地 美國(guó)
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時(shí)間 2024/11/22 8:07:01
- 訪問次數(shù) 1050
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傳染病檢測(cè)試劑,鼻咽癌篩查試劑,單胺類神經(jīng)遞質(zhì)檢測(cè)試劑,登革熱快速檢測(cè)卡,流感病毒快速檢測(cè)卡,細(xì)胞因子定量檢測(cè)試劑,流式細(xì)胞,酶聯(lián)免疫試劑盒
供貨周期 | 一個(gè)月 | 規(guī)格 | 96T |
---|---|---|---|
貨號(hào) | DDMS-1 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,制藥,綜合 |
主要用途 | 可以檢測(cè)出人血清中是否存在抗登革熱病毒源性重組抗(DENVRA I-IV)的Ig |
登革熱病毒IgM試劑盒(elisa試劑盒)
產(chǎn)品信息:
中文名稱 | 登革熱IgM檢測(cè)試劑盒 |
英文名稱 | Dengue IgM Test Kit |
產(chǎn)品貨號(hào) | DDMS-1 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 96T |
檢測(cè)樣本 | 血清 |
適應(yīng)物種 | 人 |
預(yù)期用途 | 可以檢測(cè)出人血清中是否存在抗登革熱病毒源性重組抗的IgM抗體 |
儲(chǔ)存條件 | 2~8℃ |
產(chǎn)品品牌 | 美國(guó)Inbios |
供應(yīng)商家 | 深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司 |
預(yù)期用途
DENV Detect IgM-ELISA檢測(cè)試劑是一種用來定性檢測(cè)人是否感染登革熱病毒的ELISA檢測(cè)系統(tǒng),它可以檢測(cè)出人血清中是否存在抗登革熱病毒源性重組抗(DENVRA I-IV)的IgM抗體。此診斷實(shí)驗(yàn)可輔助診斷人是否感染了登革熱病毒。此試劑盒不能用于篩查血液或血液成分,僅供體外診斷用。
檢測(cè)原理
登革熱病毒IgM試劑盒是由一種酶聯(lián)擴(kuò)大的兩步法免疫檢測(cè)系統(tǒng)。在此實(shí)驗(yàn)中,將登革熱檢測(cè)陰性質(zhì)控(代表不反應(yīng)的血清)、陽性質(zhì)控和未知抗體濃度的血清樣品加入到包被了抗人IgM抗體的微孔中溫育,之后分別加入登革熱源性重組抗原DENVRA(I-IV)和正常細(xì)胞抗原(NCA)進(jìn)行溫育。登革熱試劑盒的血清樣品必須用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋。溫育并洗板后,用HRP標(biāo)記的DENVRA(I-IV)特異性抗體處理。第二次溫育并洗板后,加入TMB底物液進(jìn)行溫育。之后再加入酸性終止液,450nm處測(cè)OD值可確定底物反應(yīng)的程度。當(dāng)高于一定數(shù)值時(shí)(臨界值),樣品的吸光度值可確定樣品中是否存在登革熱抗體。
注意:陰性質(zhì)控和弱陽性質(zhì)控以內(nèi)在質(zhì)控形式提供,其目的是為了監(jiān)測(cè)試劑盒成分的完整性。
登革熱檢測(cè)特定材料
1.抗人IgM包被的包被板:帶板蓋的板架,抗人IgM包被的96孔包被板。2-8℃下儲(chǔ)存,有效期內(nèi)穩(wěn)定。抗人IgM包被的微孔可捕獲人樣品中的IgM抗體。
2.樣品稀釋液:1瓶,25ml,含吐溫20的Tris-HCl緩沖液,0.05%的Proclin-300防腐劑。用于試驗(yàn)樣本,陰性質(zhì)控和陽性指控的稀釋,2-8℃下儲(chǔ)存,有效期內(nèi)穩(wěn)定。
3.即用型的登革熱重組抗原:1瓶,3ml,含吐溫20的Tris-HCl緩沖液,0.05%的Proclin-300防腐劑,2-8℃下儲(chǔ)存,有效期內(nèi)穩(wěn)定。
4.即用型正常細(xì)胞抗原(NCA):1支,3ml,含吐溫20的Tris-HCl緩沖液,0.05%的Proclin-300防腐劑,COS-1細(xì)胞上清。,2-8℃下儲(chǔ)存,有效期內(nèi)穩(wěn)定。
5.登革熱檢測(cè)陰性質(zhì)控:1支,50ul的陰性血清,登革熱檢測(cè)陰性質(zhì)控可輔助監(jiān)測(cè)試劑盒的完整性。2-8℃下儲(chǔ)存,有效期內(nèi)穩(wěn)定
6.登革熱檢測(cè)陽性質(zhì)控:1支,50ul的陽性血清,登革熱檢測(cè)弱陽性質(zhì)控可輔助監(jiān)測(cè)試劑盒的完整性。2-8℃下儲(chǔ)存,有效期內(nèi)穩(wěn)定
7.10倍濃縮洗滌液:1瓶,120ml,含吐溫20的磷酸緩沖鹽,2-8℃下儲(chǔ)存,有效期內(nèi)穩(wěn)定。
8.HRP標(biāo)記的即用型酶聯(lián)物,1瓶,6ml,HRP標(biāo)記的黃熱病毒活性單克隆抗體,含吐溫20的Tris-citrate緩沖液,<0.01%的硫柳汞防腐劑和添加劑,2-8℃下儲(chǔ)存,有效期內(nèi)穩(wěn)定。
9.Enwash:1瓶,20mlEnwash溶液,含吐溫20的磷酸緩沖鹽,2-8℃下儲(chǔ)存,有效期內(nèi)穩(wěn)定。
10.TMB底物液:1瓶,9ml,2-8℃下儲(chǔ)存,有效期內(nèi)穩(wěn)定。注意:底物液必須始終儲(chǔ)存于避光試劑瓶中。
11.終止液:1瓶,內(nèi)含6ml即用型的終止液,2-8℃下儲(chǔ)存,有效期內(nèi)穩(wěn)定。
注意:強(qiáng)酸,請(qǐng)戴保護(hù)手套、口罩和安全鏡,按照安全條理處理所有的材料。
登革熱IgM檢測(cè)實(shí)驗(yàn)所需器材但試劑盒不提供
■可在450nm處讀數(shù)的酶標(biāo)儀
■生物學(xué)或高純度水
■真空泵
■洗板機(jī)
■1-10ul的單道移液器,50-200ul的單道和多道移液器。
■聚丙烯試管
■Parafilm封口膜
■計(jì)時(shí)器
■旋渦混合器
登革熱IgM檢測(cè)試劑盒檢測(cè)步驟
1.陽性質(zhì)控、陰性質(zhì)控必須做雙孔檢測(cè),未知樣本血清可做單孔或雙孔檢測(cè)(DENV和NCA都得做)。按照說明書上的操作流程圖進(jìn)行操作。如果做雙份檢測(cè)的話,96孔板可做22個(gè)樣品。
2.將實(shí)驗(yàn)中使用的板條標(biāo)記好。
3.用試劑盒提供的樣品稀釋液將血清和質(zhì)控品稀釋100倍。用小聚丙烯試管進(jìn)行稀釋,稀釋時(shí)至少需要4ul血清、陽性質(zhì)控和陰性質(zhì)控。如:4ul血清加396ul稀釋液。
4.用單道或多道移液器將稀釋好的血清、陰性質(zhì)控和陽性質(zhì)控各50ul加入到相應(yīng)的微孔中。如下為22個(gè)樣品做雙份檢測(cè)時(shí)的示范圖。注意,所有的樣品都必須用DENVRA和NCA檢測(cè)。
5.用封板膠僅在開放的微孔表面封板,所有板條的底部是沒有覆蓋的。
注意:這樣是為了保證溫度的分布在每個(gè)孔的底部和血緣相等地散播。一旦頂部密封阻礙了蒸發(fā),任何多余的封板膠必需被剪掉。
6.37℃下保濕溫育板條1小時(shí),注意:不要將微孔板疊放,必須單獨(dú)地分層平輔。這對(duì)于溫度的平等分布非常重要。不要使用CO2或任何氣體,不要讓板條接觸任何濕潤(rùn)的物質(zhì),如濕紙巾等。
7.溫育后,用洗板機(jī)洗板6次,每次每孔300ul。
8.在A-D條中加入50ul DENVRA(I-IV),在E-H條中加入50ul NCA。
9.用封板膠僅在開放的微孔表面封板,所有板條的底部是沒有覆蓋的。(同步驟5)
10.37℃下保濕溫育板條1小時(shí)。(同步驟6)
11.溫育后,用洗板機(jī)洗板6次,每次每孔300ul。
12.用多道移液器在每一微孔中加入50ul HRP標(biāo)記的酶聯(lián)物。
13.用封板膠僅在開放的微孔表面封板,所有板條的底部是沒有覆蓋的。(同步驟5)
14.37℃下保濕溫育板條1小時(shí)。(同步驟6)
15.溫育后,用洗板機(jī)洗板6次,每次每孔300ul。
16.用多道移液器在每一微孔中加入150ul Enwash溶液。
17.室溫下溫育(無需蓋板)5min。
18.溫育后,用洗板機(jī)洗板6次,每次每孔300ul。
19.用多道移液器在每一微孔中加入75ul TMB底物液。
20.室溫避光溫育10min。
21.溫育后,用多道移液器在每一微孔中加入50ul終止液,室溫溫育1min。
22.溫育后,450nm處測(cè) OD值。
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