毛細管氣相色譜分析黃酒中的甜蜜素

氣相色譜分析、分離的科學方法，被廣泛應用于人類生產生活的方方面面。 在上海泰特睿杰信息科技有限公司的運營中，正在努力淘汰舊觀念，落后的模式，加快個性化腳步，讓我們的新一代國產反控GC2030plus氣相色譜儀推廣到優質的企業中，以下由泰特儀器色譜技術人員主要介紹用毛細管氣相色譜分析黃酒中的甜蜜素。

黃酒是我國的傳統釀造酒。保持適度甜味的黃酒可以給人甘醇、綿甜的愉悅感，而一些企業為改善口感，在勾兌黃酒時非法添加甜蜜素。近在各地組織黃酒抽檢中，都有檢測出非法添加甜蜜素的報道。

甜蜜素(環己基氨基磺酸鈉)是一種無營養的合成甜味劑，甜度是蔗糖的50倍，且具有良好的水溶性和穩定性，是一種優良的甜味劑。鑒于其可能致癌，目前世界上許多國家都禁止使用，我國對甜蜜素也有*，其中釀造酒中不允許添加甜蜜素。

由于甜蜜素在紫外區域具有微弱的紫外吸收，目前國標和文獻中所報道的方法多為用亞硝酸鈉分解食品中的甜蜜素，產生的環己醇在硫酸介質中繼續與亞硝酸鈉作用，生成環己醇亞硝酸酯，再用氣相或液相分析。但在黃酒發酵過程中產生的環己醇類似物會對結果造成干擾。本檢測方法在國標的基礎上對前處理方法進行改進，能有效消除測定結果中出現假陽性的可能，可用于測定黃酒中的甜蜜素。

1 儀器和設備

泰特氣相色譜儀器，帶FID檢測器；離心機；電子天平；正己烷(色譜純)、氯化鈉(分析純)、硫酸(分析純)、亞硝酸鈉(分析純)，三重蒸餾水；標準溶液配制：甜蜜素標準品用三重蒸餾水配制成10 mg/mL標準貯備液。

2 色譜分析條件

色譜柱：氣相色譜采用HP-5毛細管柱，30 m×0.32 mm×0.25 μm(膜厚)；分流 /不分流進樣口，進樣口溫度 200℃，分流比：20∶1；載氣：高純氮，載氣流速：1.5mL/min；程序升溫：200℃保持4 min，以50℃/min升至150℃；檢測器溫度 300℃，燃氣：30mL/min，助燃氣：300mL/min，尾吹：25 mL/min。

3 標準曲線的繪制

分別準確吸取10mg/mL甜蜜素標準貯備液0.1 mL、0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL 于 100 mL 聚乙烯離心管中，加水至20 mL，置冰浴中，按照1.4的方法自“加入5 mL 50 g/L亞硝酸鈉溶液…”起操作，分別相當于甜蜜素的終濃度為 0.1 mg/mL、0.2 mg/mL、0.5 mg/mL、1.0 mg/mL、2.0 mg/mL。每個濃度做5個平行，取平均值。以甜蜜素的濃度為橫坐標(X)，相對應的平均峰面積為縱坐標(Y)，做線性回歸，并繪制回歸圖。

4 樣品前處理

準確稱取20.00 g黃酒樣品于蒸發皿中，在沸水浴上蒸發干。用10 mL的三重蒸餾水分多次溶解、轉移樣品于100 mL具塞聚乙烯離心管中，置冰浴中，依次加入事先冰浴過的5 mL 50 g/L亞硝酸鈉溶液和5 mL 100 g/L硫酸溶液，搖勻，在冰浴中放置30 min，并搖動，然后準確加入10 mL的正己烷和5 g氯化納，充分搖動2 min，5000 r/min離心5 min，取上層正己烷層進行氣相分析。

黃酒樣品前處理過程中，去除酒精等醇類物質是關鍵步驟，但是樣品酒精是否除盡，還沒有確切的判斷標準。現有的關于前處理中除酒精和雜質的文獻報道也都很籠統，具體對實驗結果是否有干擾，不能確定。鑒于甜蜜素具有較好的熱穩定性，采用直接將樣品蒸發干，這樣就能將大部分干擾物質去除，而對目標分析物沒任何損失。

甜蜜素的衍生化反應必須全程在冰浴條件下進行，所有的試劑通過冰浴處理后，能夠提高衍生產物環己醇亞硝酸酯的穩定性。實驗表明，試劑冰浴后的峰面積比不冰浴的峰面積大，環己醇亞硝酸酯后面的小峰幾乎沒有，曾有報道后面的小峰是環己醇亞硝酸酯的分解產物。樣品處理后需置于冰浴中至少8 h，環己醇亞硝酸酯幾乎不分解，可不予處理，其會迅速分解。樣品離心能加速正己烷層的分層，而且能有效防止乳化。

本文建立了分析黃酒中的甜蜜素的方法。先使樣品通過沸水浴蒸發干后，在硫酸介質中與亞硝酸鈉反應，生成環己醇亞硝酸酯，后用毛細管柱分離，GC-FID檢測甜蜜素含量。結果表明，本方法線性范圍為0.1～2.0 mg/mL，醉底檢出限為2 mg/kg，加標回收率為95.4%～113.7%，相對標準偏差為2.34%～4.84%。該方法操作簡便、快速、精密度好、準確度高，比較適合用于黃酒中甜蜜素含量的測定。