透明室-用于組織透明化樣品的成像室
- 公司名稱 富士膠片和光（廣州）貿(mào)易有限公司
- 品牌 Wako/和光純藥
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2020/9/14 12:00:46
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| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
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用于組織透明化樣品的成像室
透明室
透明室是在使用顯微鏡觀察組織透明化樣品時(shí)使用的觀察容器。透明室由10套硅橡膠板、蓋玻片和載玻片組成，它能讓您輕松地觀察組織透明化后的樣品。其中有五種厚度的硅橡膠可供作墊片，分別為0.3 mm、0.5 mm、1.0 mm、2.0 mm和3.0 mm，可根據(jù)您的樣品選擇所需尺寸。
硅橡膠板的兩側(cè)貼有保護(hù)膜，可在使用時(shí)剝離，從而使載玻片與蓋玻片緊密接觸。
◆透明化工序（使用SeeDB時(shí)）
1. 在4°C下用4％多聚甲醛/ PBS固定小鼠大腦，過(guò)夜。
2. 用PBS清洗3次樣品（各10 min）。
3. 將樣品放入裝有20 mL SeeDB:20 w/v% Fructose Solution的50 mL錐形管中。在室溫下，用旋轉(zhuǎn)器旋轉(zhuǎn)試管
3. 4~8 h（月4 rpm）。易損的樣品和切片可使用蹺蹺板振蕩搖床。（約17 rpm）。
4. 將樣品轉(zhuǎn)移至裝有SeeDB：40 w/v% Fructose Solution的50 mL錐形管中，室溫下旋轉(zhuǎn)4~8 h。
5. 將樣品轉(zhuǎn)移至裝有SeeDB：60 w/v% Fructose Solution的50 mL錐形管中，室溫下旋轉(zhuǎn)4~8 h。
6. 將樣品轉(zhuǎn)移至裝有SeeDB：80 w/v% Fructose Solution的50 mL錐形管中，室溫下旋轉(zhuǎn)12 h。
7. 將樣品轉(zhuǎn)移至裝有SeeDB：100 w/v% Fructose Solution的50 mL錐形管中，室溫下旋轉(zhuǎn)12 h。
8. 將樣品轉(zhuǎn)移至裝有SeeDB的50 mL錐形管中，室溫下旋轉(zhuǎn)24 h。
圖1. 使用SeeDB的生物體樣品的透明化
從左至右分別為使用SeeDB透明化處理的小鼠胎兒（胎兒12天），新生小鼠（生后3天）的全腦，成年小鼠大腦切片（8周齡，厚度2 mm）的案例。
◆安裝方法
1. 使用與樣品尺寸相匹配的透明室
2. 使用SeeDB時(shí)，請(qǐng)使用SeeDB液安裝樣品。
*若樣品較小，觀察時(shí)會(huì)移動(dòng)的話可使用瓊脂糖凝膠等固定樣品。
◆觀察
1. 使用激光共聚焦顯微鏡或雙光子激發(fā)顯微鏡觀察SeeDB處理的大腦樣品。
*使用SeeDB透明化處理的樣品的折射率較高，為1.49。因此雖然適用于甘油浸沒(méi)透鏡，油浸透鏡以及透明化用透鏡，但是水浸透鏡的
*使用深度只達(dá)約2 mm。浸泡液請(qǐng)使用各廠商推薦的浸泡液。請(qǐng)不要使用SeeDB液作為浸泡液。使用空氣物鏡（折射率1.0）或水浸物
*鏡（折射率1.33）獲得圖像時(shí)，深度的數(shù)值需進(jìn)行校正。（校正公式請(qǐng)參閱參考文獻(xiàn)）。
◆觀察實(shí)例
圖2. 使用雙光子激發(fā)顯微鏡獲得的Thy1-YFP-H 小鼠（10周齡）大腦熒光圖像
圖3. 使用共焦距顯微鏡獲得的Thy1-YFP-H 小鼠（10周齡）大腦熒光圖像
◆產(chǎn)品列表
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級(jí) |
294-35631 | 透明室，0.3 mm厚 | 10 set | 組織光學(xué)透明試劑 |
291-35641 | 透明室，0.5 mm厚 | 10 set | 組織光學(xué)透明試劑 |
295-35661 | 透明室，1.0 mm厚 | 10 set | 組織光學(xué)透明試劑 |
292-35671 | 透明室，2.0 mm厚 | 10 set | 組織光學(xué)透明試劑 |
299-35681 | 透明室，3.0 mm厚 | 10 set | 組織光學(xué)透明試劑 |
◆相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 | 規(guī)格 |
291-79601 | SeeDB實(shí)驗(yàn)試劑盒 | 1 kit | 組織透明化 |
193-18391 | SeeDB:20w/v% 果糖溶液 | 250 mL | 組織透明化 |
196-18401 | SeeDB:40w/v% 果糖溶液 | 250 mL | 組織透明化 |
193-18411 | SeeDB:60w/v% 果糖溶液 | 250 mL | 組織透明化 |
190-18421 | SeeDB:80w/v% 果糖溶液 | 250 mL | 組織透明化 |
197-18431 | SeeDB:100w/v% 果糖溶液 | 250 mL | 組織透明化 |
194-18441 | SeeDB | 250 mL | 組織透明化 |
160-16061 | 多聚甲醛 | 100 g | 組織固定用 |
162-16065 | 500 g | ||
164-25511 | 1×PBS(-)平衡緩沖液 | 5 L | 生化學(xué)用 |
045-33421 | 細(xì)胞膜橙紅色熒光探針 | 10 mg | 細(xì)胞生物學(xué)用 |
041-33423 | 50 mg |
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