外包服務 細胞石蠟包埋

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外包服務 細胞石蠟包埋

組織石蠟包埋切片實驗步驟

1、取材：新鮮組織固定于4%多聚甲醛24h以上。將組織從固定液取出在通風櫥內用將目的部位組織修平整，將修切好的組織和對應的標簽放于脫水盒內。

2、脫水：將脫水盒放進吊籃里于脫水機內依次梯度酒精進行脫水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-無水乙醇I 30min-無水乙醇II 30min-醇苯5-10min-二甲苯I 5-10min-二甲苯II 5-10min-蠟I 1h-蠟II 1h-蠟III 1h。

3、包埋：將浸好蠟的組織于包埋.機內進行包埋。先將融化的蠟放入包埋框，待蠟凝固之前將組織從脫水盒內取出按照包埋面的要求放入包埋框并貼上對應的標簽。于-20°凍臺冷卻，蠟凝固后將蠟塊從包埋框中取出并修整蠟塊。

4、切片：將修整好的蠟塊置于石蠟切片機上切片，片厚4μm。 切片漂浮于攤片機40℃ 溫水上將組織展平，用載玻片將組織撈起，并放進60℃ 烘箱內烤片。待水烤干蠟烤化后取出常溫保存備用。

實驗注意事項：

1、固定劑應有足夠的量，一般為組織塊體積的10∽15倍。

2、根據組織的不同和實驗目的的不同，選取不同的固定劑。

3、固定時間依材料大小、固定劑種類而異，可從1小時到幾時小時，有時中間需要更新固定劑。某些固定劑對組織的硬化作用較強，作用時間應嚴加控制，不能過長。

4、取材切面要平整，厚度不易超過2mm，否則脫水效果不能，

5、對于有特許要求的組織，取材時要對目的組織的完整保留。