isoPick（iotaSciences） 可視化單細胞分選系統
- 公司名稱 KTIMES TECHNOLOGY LIMITED
- 品牌 其他品牌
- 型號 isoPick（iotaSciences）
- 產地 進口
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2024/8/19 21:50:51
- 訪問次數 3551
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| 產地類別 | 進口 |
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可視化單細胞分選系統
基于GRID技術、高通量、高自動化的單細胞可視化分選系統。isoPick采用微射流技術，利用界面張力對細胞培養基（或干細胞涂層）進行重塑，在培養皿上雕刻出單獨的細胞腔室GRID。isoPick可以在 6 厘米培養皿上創建 256 個單細胞腔室GRID陣列，并將細胞以納升體積全自動地分配到各個 GRID 單細胞腔室中，通過isoPick的光學顯微鏡可以清楚地看到 GRID 室中的單細胞。基于GRID技術和光學成像信息，isoPick可以確保分選出的細胞100%為單細胞
特點
- 全自動化流程
- 操作簡單，對細胞無損傷
- 結果可追蹤
- 分離效率高達100%
- 直接轉移到PCR管或96孔板
- 結構緊湊，體積小
優勢：
傳統單細胞分離手段無法保證所得的樣品內只有一個單細胞，有可能有多個細胞或細胞團，導致下游的實驗出現誤差。
采用的GRID技術結合圖像信息分析，結果可追蹤，保證100%準確的單細胞分選。
而且isoPick分選條件溫和，可以顯著提高分選單細胞的存活率。
同時isoPick可將單細胞樣品按照特定的體積直接轉移到96孔板或PCR管中，無縫銜接單細胞下游應用，確保后續單細胞組學信息完整性。
單細胞分選 | 單細胞克隆 | 單細胞組學 | |
100%準確的單細胞分選效率 | 顯著提升單細胞克隆的存活率（單克隆率） | 極大地簡化單細胞組學步驟 | |
技術優勢 | 傳統單細胞分選方法無法保證所得的樣品中只有一個單細胞，而isoPick采用GRID單細胞腔室分離與光學信號驗證相結合的分選技術，能夠保證分選所得的單細胞樣品中只有一個單細胞。 | isoPick可以高效分離hiPSCs單細胞，用于構建單克隆細胞系。isoPick對敏感單細胞處理溫和，能夠確保更高的單細胞存活率，達到更佳的克隆生長效果。 | isoPick可以將1.5~200 µl的單細胞樣品直接轉移至PCR管帶或96孔板中，無縫銜接后續單細胞測序scWGA流程，極大地簡化單細胞組學步驟。 |
單細胞分選前后的GRID細胞腔室 |
包被不同基質的96孔板的單細胞hiPSC集落 |
單細胞的WGA結果 |
可視化單細胞分選系統
人類誘導多能干細胞(hiPSCs)的單細胞克隆
人類誘導多能干細胞(hiPSCs)構建單克隆細胞系培養步驟繁瑣，細胞對異常的處理和操作非常敏感，
傳統單細胞分選容易導致細胞和遺傳毒性應激的積累，進而導致不良分化和多能性喪失。
使用isoPick可以溫和、自動地將人類誘導多能干細胞(hiPSCs)進行單細胞分選，以高效率培養hiPSCs單克隆細胞系，顯著提高了細胞分離與克隆效率。
K562細胞單細胞測序
傳統單細胞測序需對單細胞進行全基因組擴增（WGA），但傳統單細胞WGA受限于如何獲得單個細胞并轉移到小體積的WGA反應中。
使用isoPick自動將K562細胞拾取并轉移至含3.5 µl scWGA試劑的PCR管中，并無縫銜接scWGA反應。瓊脂糖凝膠電泳結果顯示（下圖），單細胞WGA的DNA樣本(+)中兩種基因均被特異性擴增，而陰性對照(-)沒有這兩種擴增產物，符合預期。
Prime 編輯使用與逆轉錄酶融合的 Cas9 切口酶，將 DNA 序列從“Prime 編輯"引導 RNA (pegRNA) 復制到特定基因座。通過Prime 編輯將多XI環素誘導型 Prime Editor 蛋白 (PE2) 整合到 iPSC 細胞系的AAVS1 基因組，之后使用isoPick分選轉入靶基因的hiPSCs細胞系，以確保細胞的單克隆性。（見上圖）
膠質母細胞瘤（GBM）通過表觀遺傳免疫編輯獲得骨髓相關轉錄程序以引發免疫逃逸
研究人員通過將多形性膠質母細胞瘤干細胞 (GSC) 連續移植到免疫活性宿主中，發現 GSC 通過建立增強的免疫抑制腫瘤微環境來免疫逃逸。從機制上講，GSC通過表觀遺傳免疫編輯過程引起，其在免疫攻擊后強制執行 GSC 中穩定的轉錄和表觀遺傳變化。研究中使用Irf8敲除細胞系實驗證明，Irf8的激活是細胞免疫逃逸的一個重要因素，且在體內可能通過IFNγ介導的激活發生。該研究使用isoPick構建Irf8克隆敲除系
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