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產(chǎn)品名稱：NCI-H520(肺鱗癌細(xì)胞)

規(guī)格：5×106cells

貨號：YS-02X9908

產(chǎn)品分類:細(xì)胞系

儲存條件2℃-8℃，避光儲存

運(yùn)輸條件冰袋冷藏運(yùn)輸

注意事項(xiàng)

1、使用產(chǎn)品時應(yīng)注意無菌操作，避免污染。

2、本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。

3、為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果，不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。

4、所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。

5、本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。

實(shí)驗(yàn)材料：

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶

2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞

3、50ml離心筒2個

4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊；

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；

8、酒精燈1臺；

細(xì)胞復(fù)蘇步驟：

1：水浴鍋預(yù)熱至37℃?zhèn)溆?/span>

2：準(zhǔn)備15mL離心管，并向其中加入適量培養(yǎng)基待用

3：將細(xì)胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出，放入PE手套中，迅速投入水浴鍋

4：用力搖晃凍存管，使其在1分鐘內(nèi)融化

5：用紙巾擦拭水漬，轉(zhuǎn)移至生物安全柜。用移液槍吸取細(xì)胞懸液，緩慢滴加到步驟2中準(zhǔn)備好的離心管

6：1200rpm離心3分鐘

7：棄上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，接種至新的無菌培養(yǎng)器皿中

羥基吲哚氧甲基轉(zhuǎn)移酶（hydroxyindole-O-methyltransferase）活性  20次

比色法定量檢測試劑盒  

酸羥化酶 （Tryptophan Hydroxylase）活性  20次

比色法定量檢測試劑盒  

芳香族氨基酸脫羧酶（Aromatic Amino Acid Decarboxylase）活性  20次

比色法定量檢測試劑盒  

細(xì)胞單胺氧化酶A型（MAO－A）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

組織單胺氧化酶A型（MAO－A）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

體液單胺氧化酶A型（MAO－A）活性比色法定量檢測試劑盒  20次

NCI-H520(肺鱗癌細(xì)胞)2468-21-5長春質(zhì) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

去乙酰毛花甙 規(guī)格： 100mg

578-74-5芹菜-7-O-β-D-吡喃;A 規(guī)格： 10mg

84687-43-4黃芪甲 規(guī)格： 20mg

146426-40-6Alvocidib 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

548-62-9結(jié)晶紫;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 規(guī)格： 0.1g

673-22-34-甲氧基 規(guī)格： 20mg

5'－羥基吲哚乙 規(guī)格： 10mg/支

蓖 規(guī)格： HPLC≥95%;0.2ml

39012-20-9胡黃連Ⅱ 規(guī)格： 20mg

細(xì)胞培養(yǎng)方法：

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。