常規抗生素實驗牛津杯小鋼管

     本公司生產常規抗生素實驗牛津杯小鋼管適用于抗生素原料藥、制劑的生物效價測定。符合《中華人民共和國藥典》、《中華人民共和國獸藥典》、《國家*標準》、《*標準》、《獸藥質量標準》、《進口獸藥質量標準》所規定。

    抗生素管碟檢定法是利用抗生素在攤布特定試驗菌的固體培養基內呈球面形擴散，形成含一定濃度抗生素球形區，抑制了試驗菌的繁殖而呈現出透明的抑菌圈。此法系根據抗生素在一定濃度范圍內，對數劑量與抑菌圈直徑（面積）呈線性關系，通過比較標準品與供試品產生抑菌圈的大小，計算出供試品的效價。

    ， 內徑6.0±0.1mm，外徑7.8±0.1mm，高10.0±0.1mm，每盒100支小鋼管重量差異不超過±0.05g，內外壁及兩端面光潔平坦，管壁厚薄*。配合牛津杯鋼管自動放置器使用，可以有效降低誤差。

雙碟的制備

1  倒底層培養基

    將培養基于水浴或微波爐中加熱融化，冷卻至60～70℃。將雙碟按編號平擺在水平操作臺上，用滅菌大口吸管吸取培養基20ml于雙碟內，使其在碟底均勻分布，等凝固后更換干燥的陶瓦蓋。同時用紫外光燈消毒潔凈室。

2  加菌層培養基

    將已經加熱融化的菌層培養基冷卻至48～50℃(芽孢可至60℃)，以無菌操作加入適量試驗菌懸液，搖勻，用滅菌刻度吸管吸取菌層培養基5ml，使均勻攤布在底層培養基上，置水平操作臺上，用陶瓦蓋覆蓋，放置20～30分鐘，待凝固，備用。加菌液量，事*行預測，二劑量法高濃度抑菌圈直徑應控制在18～22mm之間，三劑量法中心濃度的抑菌圈直徑應控制在15～18mm之間。

滴定和培養

1  每批樣品用九只雙碟，用鋼管放置器，二劑量法每碟安置四個小鋼管，三劑量法每碟安置六個小鋼管

2  滴加標準品與供試品溶液，因實驗設計不同而異。二劑量法，每碟中對角的兩個小鋼管分別滴加高、低濃度的標準品溶液，其余兩個小鋼管分別滴加相應的高、低兩種濃度的樣品溶液。三劑量法的6個鋼管中間隔3個鋼管中分別滴加標準品及供試品高（H）、中（M）、低（L）3種濃度的溶液，并使相同濃度成對角。滴加量以與小鋼管口齊平為宜，各鋼管加入量應盡量*。滴加溶液的順序，二劑量法應按照S_H→T_H→S_L→T_L的順序滴加；三劑量法應按照S_H→T_H→S_M→T_M→S_L→T_L的順序滴加。 滴加溶液的時間不可過長，一般二劑量法，九只雙碟應在3分鐘之內滴加完畢。

3  滴碟完畢，將雙碟以水平方向搬至托盤上，并用陶瓦圓蓋蓋好，平穩地移入恒溫室或恒溫箱,在規定溫度下培養至所需時間。

結果計算

    將培養好的雙碟取出，倒出小鋼管，測量前，應檢查各抑菌圈是否圓整，如發現破圈或不圓整應棄之。由儀器測量各抑菌圈的直徑或面積，并按生物檢定統計法進行可靠性測驗、效價計算及可信限計算。對于同一批樣品多次測定結果應進行合并計算，參加合并計算的每組數據中各技術參數均應符合要求，合并計算結果應均一，參加合并計算的初試與復試組數應接近。

特別要注意：

     不同次購買的鋼管必須同時進行重量挑選，即每套鋼管重量差異不超過±0.05g。挑選時可將新舊批次的鋼管分別混合均勻，并分別隨機取出40個稱定，求出新舊鋼管的平均重量，若新舊鋼管混合后的平均重量接近（相差≤5mg）求出新舊鋼管混合后的平均重量m，按照此重量對新舊鋼管進行重量挑選，新舊鋼管混合使用。若新舊鋼管平均重量之差超過5mg，按照新鋼管平均重量對新鋼管進行重量挑選，新舊鋼管分開使用。