羅猴胎腎細胞;MA104培養
- 公司名稱 上海研生實業有限公司
- 品牌 ATCC
- 型號
- 產地 進口/國產
- 廠商性質 經銷商
- 更新時間 2018/5/8 15:52:16
- 訪問次數 397
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細胞名稱 羅猴胎腎細胞;MA104培養
形態特性 上皮細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 MA 104 細胞衍生于羅猴胎腎。細胞對猴輪狀病毒 (Simian rotavirus SA11) 高度敏感。可用于很多病毒的增殖。
培養條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C11
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工
羅猴胎腎細胞;MA104培養貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
Anti-Cyclin E/FITC 熒光素標記周期素E/原癌基因抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Anti-LIMK1 /FITC 熒光素標記單絲氨酸蛋白激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Caspase-10 半胱胺酸蛋白酶-10抗體 規格 0.1ml
sFRP-4(Secreted frizzled-related protein 4; Frizzled protein, human endometrium) 抗子宮內膜抗原 0.5mg
HDHD1A 英文名稱: 鹵酸脫鹵酶樣水解酶域內含蛋白1A抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh SIPA1L2 信號誘導增殖相關蛋白1樣蛋白2抗體 規格 0.2ml
Anti-LIMK1 /FITC 熒光素標記單絲氨酸蛋白激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
iNOS ELISA KIT 大鼠誘導型一氧化氮合成酶Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-ZO-1 胞質緊密粘連蛋白1抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh FSIP1 纖維性鞘結合蛋白1抗體 規格 0.2ml
IGFBP-1(Mouse Insulin-like growth factor binding protein 1) ELISA Kit 小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白1 96T
Nurr1 英文名稱: 核受體相關因子-1抗體 0.1ml
APMAP 英文名稱: 脂肪細胞膜相關蛋白抗體 0.2ml
Anti-ZO-1 胞質緊密粘連蛋白1抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rabbit Anti-human sIgA/Cy7 Cy7標記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml
GNGT1 英文名稱: G蛋白γ 1/Gγ 1 抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AMID/AI 線粒體凋亡誘導因子2抗體 規格 0.2ml
Anti-Phospho-Jak3 (Tyr980/981)/FITC 熒光素標記磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗馬IgG 規格 0.1ml
Anti-SHP2/PTPN11/FITC 熒光素標記蛋白酪氨酸磷酸酶2抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
NRF-1(nuclear respiratory factor-1) 核呼吸因子-1抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Anti-Arfaptin 2 ADP核糖基化因子結合蛋白2抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ATF2(Ser44) 磷酸化活化復制因子2抗體 規格 0.1ml
EGFR-R 濃縮液 0.1ml 進口分裝
UBAP1 英文名稱: 泛素相關蛋白1抗體(鼻咽癌相關基因20蛋白) 0.2ml
DHRS7B 英文名稱: 短鏈脫氫酶/還原酶家族7B抗體 0.2ml
Anti-Arfaptin 2 ADP核糖基化因子結合蛋白2抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。