大鼠垂體瘤細胞;GH3培養
- 公司名稱 上海研生實業有限公司
- 品牌 ATCC
- 型號
- 產地 進口/國產
- 廠商性質 經銷商
- 更新時間 2018/5/7 15:24:45
- 訪問次數 444
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細胞名稱 大鼠垂體瘤細胞;GH3培養
形態特性 上皮樣
品牌 疏松貼壁,有漂浮的細胞簇
特征特性 GH3細胞系是由Tashjian AH等在1965年7月從一只7月齡的雌性Wistar-Furth大鼠的垂體腫瘤中分離建立的。GH3細胞系不是直接來源于GH1細胞系的克隆,而是從原代培養的GH1細胞在大鼠身上傳代兩次形成的腫瘤中建立的。上皮樣的GH3細胞比GH1分泌更高水平的生長激素,也可產生催乳素。對調控GH3細胞分泌蛋白類激素的研究表明,氫化可可以刺激生長激素的分泌、抑制催乳素的產生。
培養條件 F10:
Ham's F10 Nutrie?
大鼠垂體瘤細胞;GH3培養操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
Anti-HEV/FITC 熒光素標記戊型肝炎病毒抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Anti-PHD3 /FITC 熒光素標記脯氨酸羥化酶抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AUTS2 孤獨癥易感基因2蛋白抗體(自閉癥相關蛋白1) 規格 0.2ml
ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Ala22) 海葵神經毒素(35肽) 0.1mg
GRASP65 英文名稱: 高爾基體外周膜蛋白p65抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit anti-mouse Kappa light chain/HRP 辣根過氧化物酶標記的兔抗小鼠k鏈 規格 0.1ml
Anti-PHD3 /FITC 熒光素標記脯氨酸羥化酶抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
MAC(Human membrane attack complex) ELISA Kit 人膜攻擊復合物Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-L-Selectin/CD62L L選擇素抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HCCR1/BRI3BP 原基因1/bri3結合蛋白抗體 規格 0.2ml
Hp-IgG(Human Helicobacter pylori IgG ) ELISA Kit 人幽門螺旋菌IgG 96T
PCNA 英文名稱: 增殖細胞核抗原抗體 0.1ml
Blood Group Lewis b 英文名稱: 粘蛋白/巖藻糖基轉移酶3抗體 0.2ml
Anti-L-Selectin/CD62L L選擇素抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgG/APC APC標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
GIMAP5 英文名稱: GTP酶IMAP家族成員5抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APC6/CDC16 細胞分裂周期蛋白16抗體 規格 0.2ml
Anti-IL-17RD/FITC 熒光素標記白介素17受體D抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgM/HRP 辣根過氧化物酶標記的兔抗人IgM 規格 0.1ml
Anti-Rad52/FITC 熒光素標記Rad52抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Anti-Phospho-PKC gamma (Thr674) /FITC 熒光素標記磷酸化蛋白激酶C亞型G抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Anti-Human IgG(monoclonal antibody) 鼠抗人IgG單克隆抗體 (親和層析純化)Multi-class antibodies規格: 1mg
人基因/bri3結合蛋白抗體 Anti-HCCR-1 0.1ml
Dog IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗犬IgM抗體 0.1ml
FAM113A 英文名稱: FAM113A蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-RPS6KB1(Ser441+Thr444) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體 規格 0.1ml
Anti-Human IgG(monoclonal antibody) 鼠抗人IgG單克隆抗體 (親和層析純化)Multi-class antibodies規格: 1mg